高等植物净化甲醛高度依赖于甲醛脱氢酶[4-5]；根据文献资料显示植物体内代谢甲醛最关键的酶之一是谷胱甘肽依赖型甲醛家族[6]，但是其底物并不是醇或者甲醛，而是氧化甲醛和谷胱甘肽的缩合物：S-羟甲基谷胱苷肽，所以在KEGG中，对甲醛脱氢酶的正式命名为S-羟甲基谷胱苷肽。目前，关于高等植物中依懒性的谷胱甘肽脱氢酶的研究报道有很多（吊兰、绿萝、矮牵牛等），Giese M等利用同位素标记法证实吊兰能吸收并代谢甲醛[7]，其代谢产物一碳单位参与到有机酸、氨基酸、糖和脂类以及细胞壁的合成代谢中，并认为在吊兰体内有专门代谢甲醛的谷胱甘肽依赖型脱氢酶。

本研究在前人的研究基础上，经过探索发现了一种利用荧光定量PCR技术（克隆FALDH基因）快速测定不同花卉植物对甲醛的代谢能力。

1 材料与方法

1。1 实验材料

选择花叶蔓、虎尾兰、常春藤、滴水观音、吊竹梅、发财树、袖珍椰子、红掌、芦荟、绿萝、矮牵牛、吊兰、铁线蕨、玉树、万年青、文竹等常见室内花卉植物（图1）。

图1  实验的花卉植物

A: 袖珍椰子; B: 花叶蔓; C: 玉树; D: 常春藤; E: 矮牵牛; F: 滴水观音; G: 吊竹梅; H: 吊兰; I: 发财树; J: 红掌; K: 虎尾兰; L: 芦荟; M: 绿萝; N: 铁线蕨; O: 万年青; P: 文竹

1。2 对花卉植物甲醛代谢能力的分析论文网

1。2。1 MS液体培养基的配制

（1）向500 mL容量瓶中加入少量双蒸馏水。（2）用量筒取10×（即10倍）MS大量元素的母液50 mL，用微量进样器取100×MS微量元素的母液5 mL，100×Fe2+盐的母液5 mL，100×有机物的母液5 mL加入容量瓶中，用天平称取15 g蔗糖，（3）用蒸馏水定容到总体积500 mL。（4）调整培养基pH值至5。8-5。9。（5）分装到2只500 mL的三角瓶中，每瓶装入250 mL，封口后放入蒸汽灭菌锅，并灭菌25 min。

1。2。2 甲醛溶液标准曲线的制定

参照国家环境保护标准公布的方法（标准编号：HJ601-2011，水质甲醛的测定乙酰丙酮分光光度法）。（1）分别配制不同甲醛浓度的MS培养基（2）分别取含有不同浓度甲醛的MS培养基1 mL，加入4 mL Nash试剂（即：称取乙酸铵150 g，用双蒸馏水溶解，加人2 mL冰醋酸，2 mL乙酰丙酮，定容至1000 mL，放置12小时。Nash试剂均现配现用）。30℃水浴加热30 min，利用紫外分光光度仪，在413 nm下测定光密度值，每个浓度测定三次取平均值，并绘制标准曲线。

1。2。3 花卉植物代谢甲醛能力的测定

（1）取62。5 μL液态甲醛（饱和的甲醛试剂）加入500 mL 或者250 mL MS培养基中，分别制成含有50 mg/L甲醛的MS培养液。其中，50 mg/L培养液用于不同花卉植物的处理。（2）取十六种植物离体叶片各0。5 g，置于密封的培养瓶中，并加入40 mL含有甲醛的MS液体培养基。（3）将培养瓶放置于19±2℃光照环境下培养。（4）培养24 h、48 h、72 h、96 h后，用移液枪分别取样1 mL；加入4 mL Nash试剂，30℃水浴加热30 min，利用紫外分光光度计，在413 nm下测定光密度（OD）值。（5）将测定的光密度值与甲醛溶液的标准曲线进行比较，得到培养24 h、48 h、72 h、96 h后培养液中剩余甲醛的浓度，进一步比较不同植物对甲醛的代谢能力。每次测定实验重复3次以上，排除偏差较大的值取至少3次以上平均值作为测定的结果。

图2 甲醛胁迫的不同植物花卉

从左到右依次是: 空白对照; 常春藤; 吊兰; 滴水观音; 铁线蕨; 矮牵牛

1。3 利用荧光定量PCR快速分析不同花卉植物代谢甲醛的能力

1。3。1 RNA的提取文献综述

采用生物工程（上海）股份有限公司的Total RNA Extractor（Triol）抽提试剂盒提取吊兰、常春藤、矮牵牛、滴水观音、铁线蕨叶片中的RNA：（1）取不同植物的幼嫩叶片100 mg，分别置于RNase-free 1。5 mL EP管中，加入液氮，研磨成粉末。（2）加入1 mL Trizol，剧烈摇晃混合均匀，置冰上10 min，4℃，12000 r/min，离心15 min。（3）取上层裂解液，加入0。2 mL的氯仿，充分颠倒混匀，冰上孵育1-5 min，4℃，12000 r/min，离心10 min。（4）吸取0。4 mL上层水相转移到新的离心管中，加入等体积的异丙醇，充分混匀，冰上孵育10 min，沉淀RNA。4℃，12000 r/min，离心10 min。（5）弃上清，立即加入1 mL 75%酒精(DEPC处理水配制)洗涤沉淀，4℃，12000 r/m，离心5 min，根据需要可重复一次。（6）尽可能吸上清，超净台上吹干，用20 µL DEPC处理水溶解。（7）取1 µL，稀释10倍测浓度，取3 µL进行1。0%的琼脂糖凝胶电泳检测，剩余-80℃保存或进行后续实验。