试剂及仪器：Steinberg’s溶液、PX溶液（由PX母液和Steinberg溶液配置成1umol/ml、2 umol/ml、2。5 umol/ml）、促绒毛膜性腺激素（HCG）、蛋白电泳缓冲液、转膜缓冲液、10*TBST溶液、脱脂奶粉（配置成1%、4%、0。04%）等文献综述

仪器：水族箱、培养皿、恒温培养箱、解剖镜、离心机、电泳仪、转膜仪、显影盒、扫描仪

2。2蝌蚪培养及PX胚胎致畸实验

午后2-3点，选取适宜的成年雌蛙和雄蛙，皮下注射HCG（雌蛙600ul、雄蛙300ul）后置于20℃恒温水箱中，诱导其产卵。次日，待产卵后，移除成蛙，防止幼卵遭到破坏。蛙卵孵化至20期左右，用吸管小心移至盛有Steinberg’s溶液的玻璃碗中，21℃恒温培养箱培养。培养至37期后，选取90只长势良好且相似的蝌蚪，分成3组，分别放置在盛有160ml PX0mM（umol/ml），1mM，2 mM 浓度的直径15cm的培养皿中连续培养一周，观察蝌蚪的形态变化，每日移除死亡蝌蚪，记录数据并更换培养液。

在后续实验中，根据资料，对蝌蚪进行GA药物治疗。将37期的蝌蚪分成3组，每组20-30只。前三天全部培养在160ml浓度为2mM的PX溶液中。后三天，空白组1组培养条件不变，实验组分别培养至同体积PX2mM与GA1mg/ml、2mg/ml浓度的混合液中，每日观察蝌蚪状态，移除死亡蝌蚪并更换培养液。

最后数据统计，计算畸形蝌蚪的数量和百分比，以及蝌蚪的生存率，死亡率。正常和畸形蝌蚪的形态用立体显微镜捕捉，并用NIS软件成像。每次生物鉴定都会在相同实验条件下重复三次。