Q5 大盘山牛角尖 1142 120°31’E

28°58’N 1716。5 16。1 1573 236 东偏北20°

Q6 磐安高二乡 1037 120°32’E

28°53’N 1716 16。0 1700 210 西偏南15°

1。2 实验方法

1。2。1 华顶杜鹃叶表皮离析

取FAA固定后的材料，清水漂洗，用剪刀于叶片中部叶脉两侧，剪取约0。5cm×0。5cm的小块。将材料隔水煮沸软化约30min，吸干水分后，浸泡于冰醋酸和30%双氧水(体积比= 1: 1 )的混合液中，60℃水浴23-25 h。待叶片由深绿色变为透明的嫩黄绿色，叶肉组织出现大量明显气泡，上、下表皮开始分离时，把离析后的材料取出，清水洗净，移至滴加蒸馏水的载玻片上，撕取表皮，用毛笔轻扫除去残留的叶肉组织，蒸馏水清洗2-3次，每次2min，将洗净后的上下表皮用1%番红溶液(50%酒精)染色约5min，染色后再滴加蒸馏水清洗2-3次，用50%、70%、90%、100%的梯度酒精脱水，各2min；二甲苯I、II透明，各3min；中性树胶封片，制成永久装片。

1。2。2 观察和数据测量论文网

将永久装片置于Olympus显微镜下观察并统计以下指标：表皮细胞形状、表皮毛、垂周壁式样、气孔器分布、气孔器形状等。选取具有代表性的部分进行拍照。

显微镜测量软件Motic Images Plus2。0 测量并统计：

（1）表皮细胞长和宽：每个居群随机选取6个视野，每个视野下测量5个细胞，共30个数据。

（2）表皮毛长度：每个居群随机选取6个视野，每个视野下测量5个表皮毛，共30个数据。

（3）气孔器长和宽：每个居群随机选取6个视野，每个视野下测量5个气孔器，共30个数据。

（4）气孔器面积(stomata area，AS)：AS=1/4×π×L×W。式中：L为气孔器长度，W为气孔器宽度。

（5）气孔器密度( stomata density，SD)：SD = S/M。式中：S为固定视野内气孔器数目，M为视野内表皮面积。

每个指标均测量30次，用SPSS 17。0统计软件分析数据，计算其平均值和标准差，叶片特征与生境气候因子做相关性分析。

2 结果与分析

2。1华顶杜鹃叶表皮细胞的特征

6个居群的华顶杜鹃叶表皮细胞形状有多边形和不规则形两种：居群1的上下表皮细胞均为多边形，形状较长，居群4、5的表皮细胞也为多边形，但形状较方，居群2、3、6均为较长的不规则形。对比多边形表皮细胞，不规则形的细胞相互之间结合更紧密。表皮细胞垂周壁式样有平直形、浅波形和深波形：居群4、5垂周壁最为平直，居群2、6垂周壁最为深波形。各居群上表皮细胞长为45。1~55。4μm，宽为27。7~40。6μm；下表皮细胞长为38。3~55。4μm，宽为24。1~30。4μm。其中居群6的表皮细胞最大，居群2、3次之，居群1最小。表皮细胞大小在居群间差异显著（图版I：1-6）。同一叶片的上下表皮特征存在差异，表皮细胞形状和垂周壁式样有所不同，上表皮细胞比下表皮细胞稍大。

6个居群的华顶杜鹃叶片都具有表皮毛，表皮毛分布于叶的下侧，类型均为多细胞型，且在叶缘和叶脉处分布较为密集，长度较长，表皮毛长度范围是193。9~303。2μm，居群间差异显著（p<0。05），其中居群2最长，居群6最短，居群1、3居中（见图II：1-5）。叶表皮细胞下看到明显存在的含晶细胞呈簇状分布（见图版II：6）。