1  材料与方法
1.1试验地点
试验在南京农业大学试验农场进行,前茬为小麦,土壤质为粘土,耕作层有机质质量分数18.36g/kg、全氮1.02g/kg、速效氮94.8 mg/kg、速效磷22.5mg/kg、速效钾91.7 mg/kg。
1.2 试验设计与田间管理
试验采用三因素裂区试验设置,三次重复,主区为水稻品种,副区为水分管理模式,再副区为麦秸还田量。设置两个麦秸还田水平:无麦秸还田(S0)和麦秸还田量为6000kg/hm2(S6000),秸秆还田方式为经联合收割机粉碎后机械化旋耕还田。设置两个水分管理模式:(1)常规淹水灌溉(CI),3-4cm左右水层插秧,水稻移栽后至无效分蘖期田面一直保持1-3cm 的浅水层,根据降雨量大小进行适量灌排,无效分蘖期实行搁田。自孕穗开始到成熟期之前一周保持浅水层。(2)干湿交替灌溉(DWA),1-2cm浅水插秧,移栽后7d田间保持 1-3cm水层确保秧苗返青活棵,7d后进行干湿交替灌溉,用土壤水势仪监测土壤水势,根据降雨量大小进行适量灌排,当田间由浅水层自然落干至水势为-15KPa时,灌水至田面有1-3cm浅水层,再自然落干到土壤水势为-15KPa,再上浅层水。无效分蘖期实行搁田,孕穗期保持浅水层,抽穗期之后继续干湿交替,收获前1周断水,自然落干。
水稻季试验品种为淮稻5号,6月15日机插秧栽种,秧龄20d,叶龄3.3-3.5叶,株行距为13.3cm×30cm,采用30cm插秧机移栽,调节取秧量,并在机插移栽后进行人工定苗。水稻施肥为基肥氮素45kg/hm2,分蘖肥氮素135kg/hm2,穗肥氮素120kg/hm2,分蘖肥于移栽后7天和14天等量施入。磷肥P205用量10kg,全做基肥;钾肥K2O用量10kg,做基肥和促花肥等量施入。小区间薄膜包埂,单独排灌。
1.3土壤微生物有机质含量的测定
参照姚槐应的方法测定水稻成熟期土壤的微生物(包括细菌、真菌、放线菌)的数量和生物量态氮,取土样时将水稻植株连根一起挖出,收集土样。微生物采用稀释平板法计数,细菌采用牛肉蛋白胨培养基;放线菌采用高氏1号培养基;真菌采用马丁氏培养基。土壤中的生物量态氮采用改进的氯仿熏蒸法测定。
1.3.1牛肉蛋白胨培养基
牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl 5g、琼脂 15—20g、水 1000ml、pH 7.4—7.6(7.0—8.0)按照培养基的配方,准确称量牛肉膏、蛋白胨、NaCl,并依次放入烧杯中。牛肉膏余姚用玻棒挑取,然后放在表面皿中称量,接着用热水溶化后倒入烧杯。加入的纯水要先少于需用量,用玻棒搅拌均匀,然后,在石棉网上加热至牛肉膏完全溶解。用精密PH试纸测量培养基的原始PH值,如果PH偏酸,用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH,边加边搅拌,并随时用PH试纸测其PH值,直至PH达7.6。反之,则用1mol/L HCl进行调节。使最后PH为7.4-7.6。
1.3.2高氏1号培养基
    可溶性淀粉(20g),KNO3(1g),K2HPO4(0.5g),MgSO4• 7H2O(0.5g),NaCl(0.5g),FeSO4• 7H2O(0.01g),琼脂 20g,pH=7.4-7.6。根据配方用量先称取可溶性淀粉20g,放入小烧杯中,加入少量冷水搅拌至淀粉成糊状,将之前所得糊状物加入少量沸水(略少于所需要求)中,继续加热,至糊状物完全溶化。然后再称取其他各成分,并依次加入溶化。
接着配置固体培养基,根据配方称量琼脂并加入之前所得试剂中,并加热融化,用容量瓶定容,补足损失的水分。用试纸测培养基的原始PH,如果偏酸,用滴管向培养基中加入1mol/L NaOH,边滴边搅拌,并随时用pH试纸测其PH,直至PH达7.6。反之,用1mol/LHCI进行调节。
1.3.3马丁氏培养基
    K2HPO41g、MgSO4*7H2O 0.5g,蛋白胨5g,琼脂15~20g,水1000ml,自然pH。按配方先称取各成分,用少于所需量的纯水溶解。待完全溶解后,容量瓶定容并补充水分到所需量。再将孟加拉红配成1%的水溶液,在1000ml培养液中加入以上孟加拉红溶液3.3ml,混匀后,加入琼脂加热融化。调PH检测培养基的PH,若偏酸,可滴加1mol/l NaOH,边加边搅拌,并随时用PH试纸检测,直至达到所需PH范围。若偏碱,则用1mol/l HCl进行调节。在使用前先将培养基融化并降温到45℃再加入链霉素,保证链霉素不受热分解。先将链霉素配成1%的溶液,在每100ml的培养基中加入配置的链霉素溶液0.3ml,制成每毫升含链霉素30ug的培养基。
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