将培养 24h 后的第二次活化菌液 BS-10 进行第三次活化。挑取第二次活化后 平板上长出来的单菌落接种于固体 PDA 培养基中（配置方法同上），完成后放置 在 28 ºC 下的恒温培养箱中进行活化培养 24h。

挑取单菌落接种于已配置好的液体 PDA 培养基分装入三个 100ML 锥形瓶中， 每瓶的液体 PD 培养基为 50ML（此步骤同样在无菌台中操作），完成后在 35ºC 和 180 rpm 下振荡培养 24h。

2。2。6 发酵培养基的配置：

成分：①玉米粉 3。4g；②豆粕 1。5g；③Ca3（PO4）2 0。1g； ④MgSO4﹒7H2O 0。8g； ⑤K2HPO4 0。6g ；

配置方法：

先将玉米粉和豆粕过筛（100 目），称取所需克数后倒入 250ML 锥形瓶中， 再加 20ML 温水（35-50℃），将玉米粉和豆粕完全溶解，再依次加入其他药品。最后2 各加 90ML 蒸馏水定容至 125ML。 将其分为三组，