2。2。5琼脂糖凝胶电泳和回收。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。10

2。2。6 GH基因片段克隆 10

2。2。7序列比较分析 11

3  结果 12

3。1  华鳈GH基因克隆和测序结果。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。12

3。1。1华鳈提取的mRNA检测结果 12

3。1。2  PCR扩增结果 13

3。2华鳈GH基因系统进化树构建 14

3。3  GH基因的氨基酸序列比对结果 14

4。讨论。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。 17

结论。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。 18

参考文献 19

致  谢 20

1 前言

1。1 华鳈的研究现状源F于K优B尔C论V文N网WwW.youeRw.com 原文+QQ752^018766

华鳈（Sarcocheilichthys sinensis）属于硬骨鱼纲、鲤形目、鲤科、鮈亚科、鰁属，其天然分布极广，除西北高原的部分地区外，几乎遍布中国各主要水系，在平原地区的江河、湖泊均有分布。华鳈体积小，颜色独特显著，作为观赏性的鱼类深受国内市场欢迎，而且味道鲜美，具有很好的经济价值，但其生长缓慢，制约了华鳈养殖业的进一步发展，而且近几年来随着人们捕捞强度的日益加剧，以及大自然资源的污染，人为的破坏，使得华鳈野生资源日益衰减。为了更好地保护华鳈资源，科学家们开展了华鳈的驯养及人工繁殖研究[1]。宣云峰等（2010）进行了华鳈驯化养殖试验初探，结果筛选并完善了华鳈人工繁殖的最佳激素配方，探索并形成了较为完善的驯养及人工的繁殖技术[2]。宋天祥和马骏研究了华鳈的人工繁殖和早期发育，旨在为野生华鳈驯化与人工繁殖积累经验，结果分析了亲鱼性腺的成熟状况对繁殖的影响和卵的成熟状况对受精和胚胎发育的影响，表明了早期发育的特点：华鳈的受精卵为漂流性卵，有较大的卵周隙，其早期发育从总体上来看，与一般鲤科鱼类的发生规律相似，但也有其特点：如相同水温条件下，华鳈胚胎发育时间较“四大家鱼”和铜鱼慢，在水温34 ℃时胚胎仍能正常发育等[3]。

1。2  生长激素基因研究现状

生长激素首次于1945年从垂体中分离鉴定，是由脑垂体前叶合成和分泌的多肽类激素[4]。对各种动物一级结构同源性分析表明，同目、同科物种之间GH序列高度同源，硬骨鱼类不同目之间的同源性较低，只有53%-55%[5]。鱼类生长激素基因研究起步相对较晚。1985年Sekine等克隆了第一个鱼生长激素并将其重组到大肠杆菌中表达[6]。至今为止，已经克隆较多鱼类生长激素cDNA序列，但只有少数获得DNA完整序列[7]。生长激素基因在动物生长发育中的重要性，使其成为利用其多态性进行辅助育种的最佳目标基因之一[8]。鱼类基因与其他脊椎动物相比，具有较高的多态性[9-10]，利用GH基因多态性进行辅助育种可能成为鱼类基因研究的重要方向。

1。3  研究目的和意义

目前，在华鳈中的报道主要是养殖与早期发育等方面，因对短期经济效益的追求，忽略了对华鳈种质资源的研究。为了华鳈养殖业的健康发展，需要对华鳈生长情况进行研究。