枯草芽孢杆菌、PDA培养基、发酵液培养基、番茄种子、天平、称量纸、药匙、锥形瓶、烧杯、量筒、量杯、培养皿、移液枪、枪头、接种环、酒精灯、火柴、皮筋、玻璃棒等。
2。2实验步骤
2。2。1活化菌种
1)配置PDA培养基1L(750ml固体培养基和250ml液体培养基),同时解冻枯草芽孢杆菌HY-1、HY-2、HY-3;
2)在超净工作台中浇注培养基平板,待培养基冷却凝固后,将解冻好的三种菌液用移液枪分别移50ul到培养基上进行涂布,涂布完成后,将平板倒置并放入30-37℃生化培养箱中培养24h;
3)24h后,再在超净工作台中浇注培养基平板,待培养基冷却凝固后,从上一步骤带有菌液的平板中用接种环分别选取三种菌液中平整、圆滑的单菌种划线,然后倒置培养基,放在30-37℃生化培养箱中培养24h;
4)重复第三步骤,两次,即总共进行三次划线培养。
2。2。2培养种子菌
在锥形瓶中加入液体PDA培养基,用牙签分别挑取第三次划线培养后的三种菌液,接种到液体培养基上,并放在30-37℃摇床培养箱中培养24-36h。
2。2。3配置发酵液培养基
1)配置发酵液培养基;
2)在发酵液培养基中分别加入15ml摇床培养后的HY-1、HY-2、HY-3三种种子菌,放在30-37℃摇床培养箱中培养36-48h。
2。2。4种植
挑取大小、饱满程度一致的番茄种子经无菌水漂洗后,在穴盘中加入营养土,在室温条件下播种,并在每个穴盘种一颗番茄种子,因此需要70颗番茄种子。
分四组:文献综述
离心组,分为5组浓度梯度,分别为HY-1、HY-2、HY-3三种发酵液各稀释5倍,50倍,100倍,200倍,500倍,再浇灌番茄种子;
发酵液直接浇灌组,分为5组浓度梯度,分别为HY-1、HY-3、HY-3三种发酵液各稀释5倍,50倍,100倍,200倍,500倍,再浇灌番茄种子;
对照组,用尿素和KH2PO4组成的简单化肥浇灌番茄种子;
空白组,用蒸馏水浇灌番茄种子。
2。2。5记录
种植后需每天浇水,待种子萌发一个月后,记录4组番茄植株的根长、株高、茎粗、鲜重、干重、叶面积、地上部重、根鲜重、根冠比