摘要：本文建立了高效液相色谱(HPLC)最佳分离条件，使葡萄籽提取物得到有效分离。接着通过HPLC-DPPH柱后衍生反应快速筛选出HPLC分离提取物中的抗氧化成分。采用高速逆流色谱法（HSCCC）对葡萄籽提取物中抗氧化活性物质进行分离纯化，当两相溶剂体系为乙酸乙酯-乙醇-水 (20∶1∶20， v/v/v）时，以上相作固定相，下相作流动相，转速800 r/min，流速2 mL/min，此时固定相保留率为50%，通过HSCCC分离，从400mg葡萄籽提取物中分离纯化得到85mg物质1，9mg物质2，23mg物质3，4mg物质4。高效液相色谱显示分离后物质4纯度超过90%。结果表明HSCCC法能有效分离葡萄籽提取物中的抗氧化物质，该方法分离纯度高，易于操作。94626

毕业论文关键词：HPLC，HSCCC，葡萄籽提取物，抗氧化

Abstract:In this paper, the optimal separation conditions were established by high performance liquid chromatography (HPLC), and the grape seed extract was effectively separated。 The antioxidant components in the extract were then screened by HPLC-DPPH column after derivatization。 The antioxidant activity of the grape seed extract was purified by high speed countercurrent chromatography (HSCCC)。 When the two-phase solvent system is ethyl acetate-ethanol-water (20: 1: 20, v / v / v), the above phase is the stationary phase, Do the mobile phase。 When host speed is 800 r / min and flow rate is 2 mL / min, fixed phase retention can make up 50%。 The purified fraction was removed from the 400 mg grape seed extract by HSCCC obtain 85 mg of substance 1,9 mg of substance 2,23 mg of substance 3 and 4 mg of substance 4。 High performance liquid chromatography showed that the purity of the substance after separation was over 90%。 The results showed that the HSCCC method could effectively separate the antioxidant substances in the grape seed extract, and the separation purity was high and easy to operate。

Key words: HPLC，HSCCC，grape seed extract，antioxidant capacity

目录

1  前言 4

1。1  葡萄籽提取物 4

1。1。1  葡萄籽提取物抗氧化活性 4

1。1。2  葡萄籽提取物的开发利用现状 4

1。2  天然产物的抗氧化作用 4

1。2。1  抗氧化活性研究现状 4

1。2。2  抗氧化能力检测 5

1。3  高速逆流色谱法 5

1。4  本实验的研究目的和意义 5

2  材料与方法 6

2。1  材料与试剂 6

2。2  仪器与设备 6

2。3  方法 7

2。3。1  HPLC样品制备 7

2。3。2  HSCCC溶剂体系的筛选 7

2。3。3  HSCCC溶剂体系准备及样品溶液的制备 7

2。3。4  HSCCC分离纯化方法 7

3  结果和讨论 7

3。1  高效液相色谱分离条件确立 7

3。2  HPLC-DPPH柱后衍生筛选抗氧化活性物质 8

3。3  高速逆流色谱溶剂体系筛选 9

3。4  高速逆流色谱分离纯化葡萄籽提取物