1.2毒素检测方法

食品安全问题已经是人们非常关注的问题,目前现有的食品检测技术很多,包括:色谱/质谱技术、光谱技术、快速检测、电化学分析法、生物分析法等。善丛[7]向我们介绍了国内食品安全市场准入制度的实施,但是由于发展较晚,因此我国食品安全的检测方法仍旧不够完备。

现如今的中国食品安全问题日趋严重,农药超标、非法添加、假货、毒素过量等等问题一直困扰着人们。从食堂食品的中毒、三鹿奶粉添加三聚氰胺、饭店地沟油、双汇瘦肉精、蒙牛黄曲霉毒素超标、致癌辣椒、肉毒杆菌乳粉等事情中我们可以体会的到,食品安全监测不够强力,法律条例不够完善,这才让这么多的食品安全问题一次又一次的产生巨大的危害。而在中国,食品安全检测水平一直落后于发达国家,很多的检测设备都是从欧美国家引进使用的。所以,我们需要发掘、研究和完善一套可以快速、准确、易于普及和推广的检测技术,这时候光电化学生物分析法展现出它的巨大前景价值。

近年来,生物检测技术作为新兴技术正在高速发展,并且在食品检测领域里备受关注。由于人类现有的多数食品来源于动植物等自然界生物,因此食品自身有反应和辨别物质的能力。因为生物材料和食品中存在化学物质反应,所以生物技术在食品检验领域拥有巨大的应用潜力。生物检测技术具有检测效率高、特异性生物识别功能、可靠性高、技术精度高、技术要求低等优点。生物检测技术中运用较为广泛的,包括:免疫检测技术、基因探针法、生物传感技术及生物芯片技术等[8]。

生物技术是近些年人们利用现代生命科学作为基础,结合先进的科学技术,运用基础的科学原理,不断改进生物原料和生物体。本质上就是合理使用动植物体、微生物对目标物进行加工[9]。考虑到赭曲霉毒素A的严重毒性作用,开发快速敏感的赭曲霉毒素A监测平台非常重要,以确保食品安全问题,避免赭曲霉毒素A在消费过程中的风险。赭曲霉毒素A的分析通常通过常规色谱方法进行,例如薄层色谱(TLC)、高效液相色谱(HPLC)或气相色谱(GC)到超视距、荧光和质谱。这些方法涉及昂贵和耗时的样品制备步骤,例如提取、样品清除、预浓缩、分析物衍生化等。这样的分析方案很费力,需要精密的设备和训练有素的人员,不容易在实际样品中快速检测。基于毒素特异性抗体的免疫测定作为分子识别元件如酶联免疫吸附测定(ELISA),电化学免疫传感器已经提出荧光偏振免疫测定和表面等离子体共振(SPR)免疫传感器用于检测食品中的赭曲霉毒素A。尽管免疫化学方法有利于高通量筛选潜力的良好敏感性,但它们通常具有交叉反应性,基质干扰和频繁的假阴性或假阳性筛选结果。注意,所有这些免疫传感器都严重依赖于抗体的质量,并且其通过动物免疫的制备是耗时的过程,其可能需要几周并且可能易于出现稳定性或修饰性问题。适配体具有优于抗体的显着优点。由于它们易于合成和商业可用,因此它们的生产消除了动物的使用,并允许选择针对化学小分子(如毒素和其他差的免疫原性分子)的适配体。此外,适配体比抗体更耐热,耐pH,允许在变性后快速恢复其天然构象。此外,适配体可以容易地用各种化学基团如荧光染料、生物素、硫醇和酶进行修饰,从而能够设计灵活的生物传感器平台。自从赭曲霉毒素A特异性适配体开发以来,已经描述了许多适用于赭曲霉毒素A的基于适配体的生物传感器。然而,该方法没有对真实的食品或饮料样品进行评估。另外,已经报道了赭曲霉毒素A的高灵敏度电化学适体传感器,然而,需要对传感器进行修改纳米材料或化学基团是一个复杂的过程,这些传感器可能容易受到实际样品存的其他电活性物质的干扰。尽管开发了一种简单方便的基于比色适体的生物传感器来监测赭曲霉毒素A,但实际应用的达到需要的灵敏度是一个问题。在10min内使用基于pH的条带生物传感器成功检测赭曲霉毒素A,然而,这些方法是定性或半定量的,因此不利于量化食物中的毒素[10]。

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