1.5.1概述 7

1.5.2发酵条件和培养基 8

1.6技术路线和研究内容 8

1.6.1技术路线 8

1.6.2研究内容 8

1.7研究意义 9

第二章材料与方法 10

2.1实验材料、试剂及仪器 10

2.1.1实验材料 10

2.1.2实验试剂 10

2.1.3培养基 10

2.1.4实验仪器 11

2.2实验方法 11

2.2.1产DNJ菌株的初筛 11

2.2.2基因组的提取 12

2.2.3PCR扩增 12

2.2.4琼脂糖凝胶电泳 13

2.3产DNJ芽孢杆菌菌株的鉴定 14

2.4引言 14

2.5 16SrDNA鉴定 14

2.5.1基因组的提取 14

2.5.2PCR扩增 15

2.5.3琼脂糖凝胶电泳 16

2.6 PCR扩增 16

2.7琼脂糖凝胶电泳 17

2.8回收扩增产物 17

2.9T载体的连接 18

2.10转化 18

2.11PCR扩增 19

2.12琼脂糖凝胶电泳 20

2.13菌株的活化 20

2.14DNA片段的测序 20

2.15产DNJ芽孢杆菌发酵条件的优化 21

2.16引言 21

2.17材料和方法 21

2.17.1培养基 21

2.17.2主要试剂 21

2.17.3主要仪器 21

2.18发酵条件的优化 22

2.18.1发酵时间 22

2.18.2发酵温度 22

2.18.3碳源 23

2.19冷冻干燥 23

2.20DNJ样品的测定方法 23

第三章结果与分析 24

3.1豆豉中产DNJ芽孢杆菌的筛选 24

3.2豆豉中产DNJ芽孢杆菌的鉴定 24

3.3胶回收验证 25

3.4转化 26

3.5测序验证 27

3.6DNA片段的测序 28

3.7豆豉中产DNJ芽孢杆菌的发酵条件优化 32

3.7.1DNJ标准曲线的绘制 32

3.7.2发酵条件的优化 32

结论