1.3.5 碱解氮含量的测定
称取制备好的风干样品0.05g至0.5g,精确到0.0001g。置入150mL三角瓶中,加粉末状的硫酸银0.1g,然后用自动调零滴定管,准确加入0.4moL/L重铬酸甲-硫酸溶液10mL摇匀。
将盛有样品的三角瓶装上一个简易的空气冷凝管,转移至事先已经预热到200-230℃的电砂浴上加热,当简易空气冷凝管下端滴下第一滴冷凝液的时候,开始计时,消煮5min[8]。
消煮完毕后,将三角瓶从电砂浴上取下,冷却片刻,用水冲洗冷凝管内壁及其底端外壁,使洗涤液流入原三角瓶,瓶内溶液的总体积应控制在60至80mL为宜,加3至5滴邻菲啉指示剂,用硫酸亚铁标准溶液滴定剩余的重铬酸钾。溶液的变色过程是先由橙黄变为蓝绿,再变为棕红,即达终点。如果试样滴定所用硫酸亚铁标准溶液的毫升数不到空白标定所耗硫酸亚铁标准溶液毫升数的1/3时,则应减少土壤称样量,重新测定。
每批试样测定必须同时做2-3个空白标定。取0.500g粉末状二氧化硅代替式样,其他步骤与式样测定相同,取其平均值。
1.3.6 脲酶活性的测定
称取5g土样于50mL的三角瓶中,加入1mL甲苯。15min后加入10mL10%的尿素溶液和20mL pH为6.7的柠檬酸盐缓冲溶液,摇匀后在37℃恒温箱培养24h。培养结束后过滤,之后取1.5mL的滤液加入到25mL容量瓶中,再加入2mL苯酚钠溶液以及1.5mL次氯酸钠溶液,边加边摇匀。20min后显色,然后定容。在1h内用分光光度计完成578nm波长处的比色操作。最后记录数据,计算出结果[10]。
1.3.7 蔗糖酶活性的测定
称取2g土壤,倒入50mL三角瓶中,加入15mL8%的蔗糖溶液,5mLpH为5.5的磷酸缓冲液以及5滴甲苯。充分摇匀混合物后,置入恒温箱,在37℃下培养24h。第二天迅速过滤,从滤液吸取0.25mL,转入小试管中,加入0.75mL dns试剂,在沸水浴锅中加热5min后,立刻将试管移至自来水流下冷却3min。溶液会因为生成3-氨基-5-硝基水杨酸而呈橙黄色,最后将试管内液体转移至25mL容量瓶中,并用蒸馏水定容稀释。在分光光度计上于508nm处进行比色。记录数据,计算出结果[10]。
1.3.7 水稻产量的测定
取1m2内所有水稻穗,记录有效穗数、穗粒数,数出1000粒稻粒共5份,称重,取平均值,得出千粒重。N组共5组水稻,各进行上述步骤一次。
最后计算结实率和产量。结实率=每穗饱粒数/每穗粒数,产量=每穗粒数*穗数*千粒重/100,产量单位为kg/hm2。
1.4 数据分析方法
应用dps8.01与exceL进行数据统计分析。
2 结果与分析
2.1 不同密度杂草稻与水稻共生对土壤酶活性的影响
由表1可以看出,相同竞争条件下,随着杂草稻种植数量的增加,N组水稻的脲酶数据总体下降,分别比对照组下降14.6%,9.5%,17.1%,14.6%,全部达显著水平。N组水稻的蔗糖酶数据总体下降,分别比对照组下降31.5%,29.5%,35.9%,34.0%,全部达显著水平。由此可以看出,随着杂草稻种植数量的增加,水稻土壤酶浓度显著下降。
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