不同施磷量对棉（Gossypium hirsutum L.）纤维加厚发育关键酶活性的影响(2)
棉纤文的生长发育过程可分为起始、伸长、次生壁加厚及脱水成熟4个阶段[22]，花后0-15 d为纤文细胞的主要伸长期，次生壁加厚始于花后16-19 d，持续到花后40-50 d[23]，加厚发育期间纤文素的合成速率呈指数上升，同时胼胝质开始沉积。蔗糖合成酶、磷酸蔗糖合成酶、酸性转化酶和碱性转化酶是调控纤文加厚发育的关键酶系，且蔗糖合成酶[24- 26]、磷酸蔗糖合成酶[27, 28]与纤文发育关系更为密切。蔗糖合成酶（sucrose synthase, SuSy）是纤文素合成直接底物尿苷二磷酸葡萄糖（UDPG）合成的关键性酶，磷酸蔗糖合成酶（sucrose phosphate synthase, SPS）是调控棉纤文细胞内蔗糖合成的一个潜在因子[26, 28]。
综上所述，从棉纤文加厚发育过程中的酶学角度入手，系统深入地研究不同施磷量影响棉纤文品质形成的生理生态机制，不仅可为生产上合理利用有限的磷肥资源提供理论依据，还可从纤文加厚发育的角度揭示不同基因型的棉花磷需求规律。
1 材料与方法
1．1 试验设计
试验于2016年在江苏省南京市南京农业大学牌楼试验站 (118◦50’E，32◦02’N)进行盆栽试验，盆栽直径23cm，深49cm，装土约60kg。土壤为黄棕壤土，速效磷含量16.1-21.0 mg kg-1，呈弱酸性pH6.7。试验选择本实验室筛选得出的亲缘关系相近且磷敏感性差异明显的2个短季棉品种（低磷敏感型棉花品种鲁54、耐低磷型棉花品种豫早棉9110）为供试品种，设置5个施磷量(0、50、100、150、200 kg P2O5 hm-2)，磷肥作为基肥一次性施入。以品种为主处理，施磷水平为副处理。2016年5月18日营养钵育苗，3叶期时选择生长一致的壮苗移栽。
氮肥施入量为225 kg N hm-2 (苗期60%+花铃期40%)；钾肥施入量为225 kg K2O hm-2；其他管理按高产栽培要求进行。盆栽试验同一品种同一处理设置12盆，重复三次。单位重量土壤施肥量与大田相同，大田土重按2.25×106 kg hm-2计算。
1．2 测定内容与方法
待棉花开花后，对棉株4-6果枝第1、2果节的当日白花进行挂牌标记，分别于花后10d、17d、24d、31d、38d 取生长发育一致的5-6个棉铃（上午9:00-10:00取样），在冰浴上将纤文与棉籽分离，液氮速冻后于-40oC下保存供测定酶活性用。
蔗糖合成酶用果糖和UDPG比色法测定[20]，磷酸蔗糖合成酶用6-磷酸果糖和UDPG比色法测定[19]，酸性、碱性转化酶活性用DNS显色法测定[19]，酶活性以每克鲜样重的酶活力单位表示。
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