长江下游地区养殖水产品中磺胺类抗生素分布特征及人体健康风险评价(2)
磺胺类抗生素，具有低价、化学性质稳定、环境流动性强和抗菌谱范围广的特性而被广泛地用于水产养殖业中，也是目前养殖环境中最常被检出的一类抗生素之一。磺胺类抗生素的抗菌活性是在随着1935年发表的名为“A Contribution to Chemotherapy of Bacterial Infections”出版物之后被提出的。随后，它们主要被用于预防和治疗人类疾病和牲畜类疾病。磺胺类抗生素作为抗菌剂，对鱼类的细菌性败血症，疖疮病，鳃炎，肠炎病等疾病具有良好的效果。 据报道，已有磺胺类抗生素混合到饲料中作为生长促进剂和预防一些疾病。此外，磺胺类抗生素抗性基因的高发生率反映了磺胺类抗生素的过度使用及其可能存在对人类健康的潜在威胁。欧盟和中国确定了动物食品中使用的磺胺类药物的最大残留限量（MRLs），鱼肉中的磺胺类药物均为100 μg.kg-1。
长江下游流域是我国重要的淡水区，游经江西、安徽、江苏和上海等地，长约835公里，流域面积共约13万平方公里，是长江水流量最大的河段，也是全国重要的淡水养殖基地，是全流域最富庶的地区。它孕育了丰富的鱼类，包括野生的和人工养殖的，养殖品种像团头鲂、鲈鱼、鳊鱼、虾和螃蟹等；野生品种如似鱎、刀鲚、翘嘴鲌、刺鳅、舌鳎、罗非鱼和黄鲶鱼等等。然而，尽管水产品中的抗生素残留对生态环境和人体健康可能具有潜在的风险，长江下游区域的水产品中抗生素残留方面的研究却很少。然而，长江下游区域水产品中抗生素污染问题却不容轻视。
本实验在参考文献的基础上，利用分散固相萃取超高液相色谱串联质谱法检验长江下游地区养殖水产品中磺胺类抗生素的分布特征。采集了人工养殖的水产品和野生的水产品两种，水产品中磺胺类抗生素的检出情况将通过比较不同生长期的野生样品和养殖样品来作分析，以此来辅助理解不同的栖息环境下的抗生素残留情况以及判断他们的残留水平。再者，每日摄入估测值（EDI）在根据上述数据的基础上计算出人们每日通过膳食这些水产品后的膳食暴露量。尽管水产品中的抗生素残留对生态环境和人体健康可能具有潜在的风险，长江下游区域的水产品中抗生素残留方面的研究却很少。本研究希望，能为水产品尤其长江下游流域淡水区域的水产品中的抗生素残留研究提供一些参考，并且能为人们对水产品的健康膳食的正确理解做出指导，本研究也希望能使更多人关注到水产品中抗生素污染的现状。
1材料与方法
1.1 仪器与试剂
选取12种磺胺类抗生素用作分析。包括磺胺嘧啶 (SDZ)、 磺胺甲恶唑(SMX)、磺胺噻唑(STZ)、磺胺甲基嘧啶(SM1)、磺胺二甲嘧啶 (SM2)、磺胺异恶唑(SIZ)、磺胺甲氧嘧啶 (SMD)、磺胺甲氧嗪(SMP)、磺胺间甲氧嘧啶(SMM)、磺胺氯哒嗪(SCP)、磺胺喹喔啉 (SQX) 和磺胺甲氧嘧啶(SDM)均购自安普（马萨诸塞州）。丙酮腈(ACN)和甲醇是从默克公司（德国）购买的。甲酸(FA)、乙酸(AA)和高氯酸(PA)是从美国马萨诸塞州的AMP公司购买的。甲酸是UPLC等级，高氯酸是保证试剂(GR)。
取10mg（精确到0.01mg）SAs与50ml甲醇混合配成标准溶液。从标准溶液中转移250uL到15ml聚丙烯离心管，并用甲醇溶液（体积比50/50）定容至10mL。用适当体积的甲醇溶液溶解混合的标准溶液。-20℃下保存。
1.2 样品采集
本次研究采集了两种样品：野生型和人工养殖型。2016年6月在长江下游捕获了21个野生型的样品，其中包括刀鲚、翘嘴鲌、刺鳅和舌鳎等13个品种；在2016年6月和8月，在4个地理位置不同的水产养殖场（包括常州市、宜兴市、湖州市和苏州市）选择虾，螃蟹，鲂和鲈鱼，四种最常见的养殖品种，以及22个鱼池和61个（其中6月39个，8月22个）水产养殖样品用于分析磺胺类抗生素残留情况。这样的采集方法有助于分析开始大量使用抗生素的时期以及探讨水产养殖鱼类中磺胺类抗生素残留的情况。将获得的样品储存在聚乙烯袋中，并在处理前于-20℃下冷冻。不同鱼类的名称，收集区域，长度和重量等信息如表S1所示。制备约5 g匀浆鱼肌肉样品（湿重）用于以下提取过程。