LA对ABA诱导的气孔关闭的抑制作用(2)
虽然，ALA 对气孔运动的调节作用已经阐明，且其作用机制也取得了突破性的进展。然而，ALA 调节气孔的作用究竟是其自身的作用还是其在植物体内的代谢物的作用，始终不清楚。乙酰丙酸（LA）是 ALA 在植物体内代谢的抑制剂，能够阻断 ALA的代谢，使合成的 ALA 在植物体内不断积累。为了探索 ALA 调节气孔的作用究竟是其自身的作用还是其在植物体内的代谢物的作用，本文系统研究了 LA 对 ABA 诱导的气孔关闭的抑制作用的动态变化，H2O2和 Ca2+是 ABA 调节气孔运动的重要信使，因此我们进一步研究了 LA 对 H2O2和 Ca2+诱导的气孔关闭的抑制作用的动态变化，同时测定了 LA 对植物叶片 ALA 含量的影响，通过分析以上结果，我们初步推测 ALA 调节气孔的作用应该是 ALA 自身的作用，而不是其在植物体内的代谢物的作用。本研究为深入揭示 ALA 的作用机制奠定了基础。
1 材料与方法
1．1 试验材料MS 培养基配置：取 MS 粉 2.37 g 、蔗糖 15 g 、琼脂 4 g 和蒸馏水 500 mL倒入烧杯中，搅拌均匀后加入 NaOH 溶液，用精密试纸（PH5-6）检测，调控培养液的 PH 调至 5.8~6.0。倒入锥形瓶中用两层封膜封口，将其放入灭菌锅中 121℃灭菌 20 min 左右。拟南芥种植与培养： 选取籽粒饱满、 大小一致的野生型拟南芥 （Arabidopsis thaliana）种子，经种子消毒处理后，利用微量进样器均匀铺于 MS固体培养基上。种子点样完毕后，将培养基密封，置于 4℃温度保持 3-4 天以打破休眠。待春化完毕后，将培养基转入培养箱（室）中培养，培养条件为：温度 21℃，光照强度 5500 lx ± 300 lx，光照时间12 h。待幼苗垂直生长达 2-3 周龄时，取其叶片作为实验材料。 ；将于培养基中生长 4周的幼苗移植到盛有体积比为 1:2:1 的泥炭土、蛭石和珍珠岩组成的基质穴盘中，用塑料薄膜覆盖后，置光照培养箱内培养。培养期间相对湿度为80%，光/暗周期为 10 h /14 h 暗，光期光强 240 μmol•m-2•s-1，温度为 22℃，每两天浇水一次，待幼苗达 3 周龄时将盆栽移至天台塑料棚内培养。待幼苗达6周龄时取生长良好拟南芥完全展开的莲座叶作为实验材料。