1.1.1  材料选择      7~8月份,选取阳光玫瑰葡萄一年生新嫩枝条,剪取 2~3cm 的单芽茎段作为外植体。
1.1.2  材料处理     先将外植体放入自来水下冲洗 1 min,清洗掉异物;再使用肥皂水进行浸泡清洗 4  min,清除细小异物、杀菌;最后进行 4  h以上的蒸馏水冲洗,保证肥皂水、吸附物、细菌等杂物的充分消除。
1.2  试验方法
1.2.1  外植体消毒时长的筛选    将洗净的外植体在超净工作台上使用 75%酒精浸泡30  s,消除表面气泡,并进行初步杀菌。再使用0. 1% HgCl2试剂对外植体消毒,消毒时间分别为3 min、5 min、10 min、15 min。然后使用无菌水冲洗外植体冲洗 10 s,完全清除 HgCl2试剂的残余液体。最后将消毒完毕的外植体接种在以 MS 主体的培养基上进行启动培养,并附加不同浓度配比的 IBA 与6-BA溶液。培养  10 d 后,统计茎尖存活率(以茎尖是否萌发出小叶片为存活标准)。培养基中均加入  3%蔗糖, 0.6%琼脂, pH 为  5.8~6.0,光照强度为  40 mmol/(m 2 •s),光周期为16 h/8 h(光/暗),培养温度为(25±1) ℃。
1.2.2  初代培养基的筛选    初代培养基使用 MS 做为基本培养基,分别添加  6-BA 1.0、1.5、2.0 mg/ L  和  IBA 0.02、0.05 mg/ L,进行激素配比试验,,筛选出适合外植体启动分化的培养基。培养15d后,统计茎尖芽萌发个数。培养基中均加入  3%蔗糖, 0.6%琼脂, pH 为  5.8~6.0,光照强度为  40 mmol/(m 2 •s),光周期为16 h/8 h(光/暗),培养温度为(25±1) ℃。
1.2.3  继代培养基的筛选     继代培养基使用 MS 作为基本培养基,添加1. 0 mg/ L  6-BA  + 0. 03 mg/ L  IBA  +  GA 0. 2 mg/ L,进行MS、3/4MS、1/2MS 的配比试验,筛选出适合茎尖增殖培养的培养基。培养15d 后,统计茎尖的增殖数量。培养基中均加入  3%蔗糖, 0.6%琼脂, pH 为  5. 8~6. 0,光照强度为  40 mmol/(m 2 •s),光周期为 16 h/8   h(光/暗),培养温度为(25±1) ℃。
1.2.4  生根培养基的筛选    生根培养基使用 1/2  MS 作为基本培养基,分别添加 6-BA 1.0、1.5、2.0 mg/ L,进行激素配比试验,筛选出适合茎尖生根培养的培养基。培养20 d后,统计根长。培养基中均加入  3%蔗糖, 0.6%琼脂, pH 为  5.8~6.0,光照强度为  40 mmol/(m 2 •s),光周期为 16 h/8 h (光/暗),培养温度为(25±1) ℃。 1.3  数据处理 根据下列方法统计阳光玫瑰茎尖离体培养存活率,启动培养的生长率  ,增殖过程中的增殖率、增殖系数及生根过程中的生根率。利用 SPSS 软件对各组数据进行相关显著性分析,从中得出最优的激素配比,建立起最优茎尖培养体系。 成活率  = (茎尖萌发数量&pide;茎尖接种数量) ×100 % 萌芽率  = (萌发芽数量&pide;接种芽数量) ×100 % 增殖率  = (茎尖增殖数量&pide;茎尖接种数量) ×100 % 增殖系数  =  培养增长节位数&pide;接种时节位数 生根率  = (诱导生根茎段数&pide;接种茎段数) ×100 %

 
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