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苏淮猪肠道发育及其与肠道中营养物质消化率的相关性分析(3)
2)烘干 将自封袋中的样品倒入塑料烧杯中,编号与自封袋上的编号一致。将烧杯均匀摆到烘箱中,65 ℃至烘干。
3)粉碎 用粉碎机粉碎过40 目筛。
在试验室分析结肠内容物中粗蛋白质、粗脂肪、粗纤文的含量,测定方法如下:
1.4.2 盐酸不溶灰分:采用GB/T23742-2009介绍的方法进行测定。
试样称量 称量5 g试样于250 mL-400 mL烧杯中,准确至0.01 g。
测定 在含有试样的烧杯中依次加入25 mL水与25 mL稀盐酸。混匀后静置至泡沫消失,再加入50 mL盐酸。如果还有泡沫,静置至泡沫消失。于微沸水浴锅中加热烧杯30 min或更长时间,直至所有淀粉完全水解。
用不含灰分滤纸过滤溶液,用50 mL热水冲洗滤纸与残渣。
将带有残渣的滤纸置于煅烧器皿上,在干燥箱内,103 ℃±2 ℃烘干2 h。再放于马弗炉内550 ℃灼烧3 h。让煅烧器皿于干燥器中冷却至室温。
1.4.3 粗蛋白:采用FOSS全自动凯氏定氮仪Kjeltec8400测定。CP表观消化率计算公式:CP(%)=100×[1-(饲料中AIA的含量×粪便CP中的含量)/(粪便中AIA的含量×饲料中CP的含量)]。
称取充分混匀的固体试样0.2 g至消化管中,再加入0.4 g硫酸铜、6 g硫酸钾及20 mL硫酸于消化炉进行消化。当消化炉温度达到420℃之后,继续消化1 h,此时消化管中的液体呈绿色透明状,取出冷却后加入50 mL水,于凯氏定氮仪(使用前加入氢氧化钠溶液,盐酸或硫酸标准溶液以及含有混合指示剂A或B的硼酸溶液)上实现自动加液、蒸馏、滴定和记录滴定数据的过程。
1.4.4 粗脂肪:采用GB/T5009.6-2003介绍的方法一(索氏抽提法)进行测定。EE表观消化率计算公式:EE(%)=100×[1-(饲料中AIA的含量×粪便中EE的含量)/(粪便中AIA的含量×饲料中EE的含量)]。
称样:称取2.00 g样品
抽提:将滤纸筒放入脂肪抽提器抽提筒内,将连接且已干燥的接收瓶,将无水乙醚从抽提器的上端加入,直至抽提器容积三分之二处,置于水浴锅上加热抽提6-12 h,使无水乙醚不断回流,将粗脂肪提取出来。
称量:将接收瓶取下,回收无水乙醚,待接收瓶内无水乙醚剩1 mL-2 mL时,置于水浴锅上蒸干,再于100 ℃±5 ℃干燥2 h,放干燥器内,冷却0.5 h后称量。上述操作不断重复直至质量恒定。
1.4.5 粗纤文:采用AOAC 962.09介绍的方法测定。其中消煮器采用ANKOM A200i半自动纤文分析仪。CF的表观消化率CF(%)=100×[1-(饲料中AIA的含量×粪便CF中的含量)/(粪便中AIA的含量×饲料中CF的含量)]。
(a) 用耐溶剂的记号笔给滤袋编号,称重(m1)。
(b) 直接准确称取1.0(±0.1)g 制备好的样品(m)于滤袋中。样品需要粉碎过1 mm筛。
(c) 在距离滤袋上边缘大约4 mm用封口机封口。然后将样品在滤袋中展平,均匀分布。
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