大鼠乳腺ACBD6环形转录本的克隆与验证(2)
研究显示， circRNA 能在人体细胞中广泛表达， 在转录后水平具有调控基因表达的重要功能。有些circRNA 具有天然微小RNA （microRNA, miRNA） 的海绵作用，可通过与miRNA 的结合而抑制其活性， 从而调控miRNA靶标发挥作用[9]。circRNA的组织特异性和稳定性使其有可能成为一种良好的生物标志物circRNA与疾病发生的密切相关，通过与疾病关联的miRNA相互作用，circRNA在疾病发生中发挥着重要的调控作用，可望成为新型疾病临床诊断的标志物，在疾病的防治领域展现出光明的潜在的应用前景[10]。
哺乳动物乳腺发育和哺乳的代谢途径和激素调节已经研究了几十年,但乳腺发育和哺乳的规律仍不完全清楚。在过去的十年里高通量测序技术和生物信息学方法初步揭示了哺乳期的基因调控网络[11-13]。有趣的是,最近非编码RNA,像微小RNA，长链非编码RNA被报道在乳腺功能上扮演重要角色[14]。ACBD6是酰基辅酶A的结合域，长链酰基辅酶A酯类在脂质合成和脂肪酸降解中作为重要中间体，除了这个基础功能,大量积累的证据表明长链酰基辅酶A酯也在中间代谢调节和基因调控有重要功能[15]。本课题组之前通过高通量测序发现在大鼠乳腺中ACBD6的表达量非常高，据此推测其在泌乳或繁育中发挥一定的作用。目前已有研究表明，人类ACBD6在造血和血管发育方面有功能[16]。本实验将从大鼠乳腺中提取总RNA并克隆出ACBD6的疑似环形转录本，通过两种不同的方法来验证大鼠乳腺ACBD6环形转录本的环形结构并通过对其二级结构的预测推测它的生物学功能。本实验以大鼠乳腺作为模型，探讨ACBD6环形转录本的结构与功能，一方面可以丰富非编码RNA的基础分子生物学理论，另一方面可以进一步揭示泌乳调控的分子机制，为泌乳生理障碍相关疾病的治疗以及奶牛泌乳性能的营养调控提供理论依据，兼具理论价值和实践意义。