在小麦幼苗期处理7d后,取小麦植株同位叶的叶片测定生理生化指标(光合速率、蒸腾速率、气孔导度、二氧化碳吸收率、叶绿素含量、可溶 性糖含 量、PPO活 性、P OD活 性、CA T活 性、M DA含 量)。
1.4 仪器和设备
HH-S型水浴锅                                  巩义市英峪予华仪器厂
SpectrumLab22PC分光光度计                     上海棱光技术有限公司
GZX-9240MBE电热恒温鼓风干燥箱       上海博讯实业有限公司医疗设厂
SW-CJ-2FD洁净工作台                 上海博讯实业有限公司医疗设备厂
LDZX-40KBS型立式电热压力蒸汽灭菌锅             上海申安医疗器械厂
TG16台式高速离心机                        湖南仪器仪表总厂离心机厂
1.5 小麦幼苗生理生化指标的测定
    小麦幼苗光合参数用便携式植物光合测定仪测定;叶绿素含量的测定采用丙酮和95%乙醇(V:V为1:1)浸提分光光度法[15];可溶性糖含量的测定采用蒽酮比色法[16];PPO活性的测定采用分光光度法[16];POD活性的测定采用愈创木酚法[17];CAT活性的测定采用紫外分光光度法[18];MDA含量的测定采用硫代巴比妥酸(TBA)法[19]。
1.5.1 叶绿素的测定
1.5.1.1 实验试剂
 无水乙醇,80%丙酮,碳酸钙,石英砂
1.5.1.2 操作步骤
(1)取样:剪去小麦幼苗叶片,将表面的污渍清理,用剪刀剪成小片,称取0.2g,放进混合浸提液(无水乙醇:丙酮=1:1)的25mL容量瓶中,分别在液面上升的刻度处划一记号,盖上瓶塞。放在40℃温箱中浸提24h,浸泡至叶片发白,用浸提试剂定容至所划记号处,摇匀备用。
(2)吸光度测定:取提取液小心倒进光径为1cm的比 色 皿里面进行比色。以浸提试剂为空 白测 定吸光度。分别测定OD652值。
1.5.1.3 结果计算
叶绿素含量用以下公式:
   叶绿素总量(mg/g)=(OD652/ 34.5)×(V/W)×1000
    式中: V:植物样品稀释后的体积(mL); W:小麦幼苗的鲜重(g)
1.5.2 可溶性糖含量的测定
1.5.2.1 实验试剂
乙醚;草酸钠;饱和醋酸铅;葡萄 糖标 准溶 液:称量放在80℃烘箱里面烘到重量不变的葡 萄糖100mg,配出500ml溶液,则可得到每ml含糖为200μg的标准溶液。
蒽酮试剂:称取1g提纯过的蒽酮,用1000mL的稀硫酸进行定容。测定时现配现用。
稀硫酸溶液:用760mL浓硫 酸(比 重是1.84)定容到1000mL可得到。
1.5.2.2 操作步骤
(1) 可溶性糖的提取
称取重约1.0g的小麦幼苗叶片,在研钵里面加入少量乙 醚,细致的磨出细腻的匀浆,放进烧杯里面,再缓慢倒进温度为70 ℃的蒸馏水洗涤研钵中残留物质,将经蒸馏水冲洗过的物质一并倒入烧杯内,之后加入蒸镏水30~40mL。把烧杯小心的放进水浴锅里面受热,保持温度70~80℃约半小时,等到溶液至室温后加入饱和的中 性醋  酸铅溶  液,等到加进去的醋酸 铅不能够再出现白色沉淀就停止加入。然后将此混合物连同残渣一并 洗进100mL容量瓶,加入蒸馏水直到达刻度线为止,充分的进行振 荡。用经过干燥的漏斗把溶液过滤到三角烧瓶中,在瓶子里面先放进一些草酸 钠的粉 末,去掉滤液里沉淀的醋酸 铅,去除掉成为固态了的草酸 铅,再次过滤一次溶液,最后得到的无色溶液就是可溶    性 糖的待测液。
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