利用酵母菌发酵水稻秸秆与甘薯生产燃料乙醇条件的响应面法优化(2)
作为一种真菌的酵母菌而言，它是单细胞，能生存在有氧气的的环境下，也能生长在没有氧气的环境下生长。在人类文明史，人类应用微生物进行生产活动，酵母菌就是其中之一，因此是一直沿用至今的生产乙醇的发酵菌株之一[1]。其拥有优良的工业化生产的性状，具有较快消耗葡萄糖的速度，对发酵产生的高浓度乙醇具有很好的耐受力，发酵过程中出现的一些不利于菌株生长的物质对酵母菌的影响也相对较小[2]。
研究酵母菌生产乙醇的最优条件的过程中，为了提高乙醇的产量和品质，或者是为了降低成本，都需要做试验设计。响应面设计的方法(Response Surface Methodology，RSM)就是利用了合乎原理规划的实试验设计方法并且通过一系列实验而得到了一定的数值结果的，是采用了多元二次回归方程来拟合相应的因子与其响应值之间的函数关系的[3]。通过对该多元二次回归方程的分析来寻找得到生产工艺过程中的最佳因素是哪些，RSM是解决多个变量问题的一种有效的统计试验方法[16]。这篇论文就是利用响应面设计法（RSM）来探究并酵母菌发酵水稻秸秆与甘薯来生产燃料乙醇的条件，并对其进行优化。
1 材料与方法
1.1供试材料
1.1.1试剂及其配制
⑴ DNS（3，5-二硝基水杨酸）显色溶液：称取91g酒石酸钾钠溶于500 mL水中，在1000 mL的大烧杯中彻底溶解，可以使用磁力搅拌器。于溶液中按照一定的顺序加入DNS（3，5-二硝基水杨酸）3.15 g，NaOH 20 g，在磁力搅拌器上溶解掉，接着再加入重蒸酚2.5 g和无水亚硫酸钠（Na2SO3¬）2.5 g，搅拌使之充分溶解，冷却到了常温之后定容至1000 mL，贮于棕色试剂瓶，存放6天后再使用。
⑵ 0.2 mol/L醋酸-醋酸钠缓冲液（pH值为4.6）：1号溶液为0.2 mol/L醋酸：移取冰醋酸12 mL，用三蒸水定容到1000 mL；2号溶液：0.2 mol/L醋酸钠：称取13.61g NaAc•3H2O溶于500mL的蒸馏水中。移取1号液5.1 mL混合4.9 mL 2号液。
⑶ 1% 羧甲基纤文素钠盐溶液：称1g CMC-Na(羧甲基纤文素钠)盐，加入100 mL的醋酸-醋酸钠缓冲液，温水溶解。冷却至室温后定容至1000mL。
⑷ 1 mg/mL标准葡萄糖溶液：称取G（葡萄糖）0.1g，加适量水使之溶解，定容到100mL即可。
⑸ 生理盐水：取一个锥形瓶，称取0.9 g氯化钠，倒入三蒸水，充分溶解，最后定容到100 mL[4]。
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