5 讨论 11

6 结论 11

参考文献 12

致谢 13

图清单

图序号 图名称 页码

图4-1 不同样品秦川牛基因组DNA琼脂糖凝胶电泳图 13

图4-2 秦川牛基因P2和P6位点的PCR-SSCP电泳图谱 14

图4-3 P2位点的部分测序峰图，红色箭头标明SNPs

图4-4 秦川牛bta-miRNA-101基因P6位点的部分测序峰图，红色箭头标明SNPs 15

表清单

表序号 表名称 页码

表2-1 实验动物情况 9

表2-2 实验主要试剂 9

表3-1 6对引物序列图 11

表3-2 10μL体系PCR配方图 11

表3-3 PCR反应程序图 12

表3-4 聚丙烯酰胺凝胶配料表 12

表4-1 秦川牛bta-miRNA-101基因P2位点的基因频率和基因型频率 15

表4-2 秦川牛bta-miRNA-101基因P6位点的基因频率和基因型频率 16

表4-3 秦川牛bta-miRNA-101基因P2位点对秦川牛体尺性状的方差分析 16

表4-4 秦川牛bta-miRNA-101基因P6位点对秦川牛体尺性状的方差分析

秦川牛bta-miRNA-101遗传多态性与生长性状关系分析

1 前言

最近几年来，随着社会的发展，时代的进步，人民生活水平逐渐提高。肉牛产业迅速发展，逐渐成为人们重点关注的畜牧业产业之一。在历史上，我国秦川牛以役用为主，但是近年来，随着人们对牛肉的需求快速增加，我国已成为世界上第三养牛和牛肉消费大国，这与肉牛繁殖率低、扩繁速度慢的现状形成强烈矛盾。所以如何满足逐渐扩大的消费需求成为育种工作者亟待解决的问题[1]。

家畜的生长性状是十分重要的经济性状，也是其选育的重要指标。传统的育种方法虽有一定的效果，但仍存在许多缺陷。因此可以采用现代分子生物学技术与传动育种手段相结合的方法来改善这一问题[2]。最近几年来，随着分子生物技术的进步和发展，PCR-SSCP、PCR-RFLP等遗传育种手段也有了越来越多的应用。分子育种更广阔地应用到了家畜育种业，大大提高了选择的准确性，使得品种的改良和新品种的培育时间大大缩短[3-4]。

要提高家畜的经济性状，如果采用常规育种方法的话，往往需要长时间较为复杂的杂交后多代选优才有可能筛选与培育出具备优质、高产特性的优良品种。但这种方法不利于新品种引入。分子育种可以避免这个问题的产生并且极大的提高育种效率，促进秦川牛遗传资源的开发与利用[5-6]。

bta-miRNA-101是miRNA的一种，它主要通过与靶基因mRNA的相互作用，对靶基因的表达起调控作用。已有研究表明，miRNA种子序列及前体序列的突变，将会改变对靶基因表达的调控，从而影响表型性状。目前国内外对bta-miRNA-101的研究主要集中在其对癌症疾病的调控和影响，对秦川牛遗传多态性和生长性状关系的研究较少[7-8]。所以，本研究主要采用DNA测序技术结合PCR-SSCP来寻找与秦川牛生长性状相关的分子标记，为秦川牛产肉性状的高效选育提供分子育种的遗传学依据。