遗传多样性是指基因和基因型的多样性,是生物多样性的基础,体现在群体水平、个体水平、细胞水平、分子水平等不同水平上。一个物种基因型越丰富,其适应环境的能力越强,是生物生存和进化的前提。由此,我们可以通过研究物种的遗传多样性来追溯物种的进化历史,还能通过遗传多样性的研究来拯救濒危物种。在实际运用中,我们还能通过对遗传多样性的研究来改良动植物育种,为其引入优异的种质。

为改变我国大麦遗传基础单一的困境,我们需要研究不同来源、不同地区的大麦,为大麦优异种质的引入提供参考。经我们调查后,发现欧洲大麦产量颇高,其环境适合大麦的生长。欧洲酿造大麦的产量占全球40%左右, 与世界其它地方相比其大麦产量处于第一[4],更值得我们关注的是:欧洲大麦在抗逆性和丰产性方面都有值得我们借鉴的地方[5]。由此,研究欧洲大麦种质多样性对中国大麦育种工作来说是意义重大的,为增加中国大麦遗传多样性提供了一条有效途径。

常用的遗传标记主要有:细胞学标记、形态标记、生化标记和DNA分子标记。而DNA分子标记是近20年,快速发展起来的分子标记技术,具有不受气候影响、多为共显性、多态性高、遗传稳定、操作简单等优点,已经越来越多的被用来研究分析植物遗传多样性。常用的分子标记技术有RFLP[6]、AFLP[7]、RAPD[8]、ISSR[9]、SSR[10]、SRAP[11]等。总的来看,各种分子标记各有优缺点,可以根据具体不同的需求及实验条件来选择适合的标记,在本次实验中我们选择的是多态性高、稳定性好、具有共显性、容易检测、结果稳定、操作简单的SSR分子标记(简单重复序列)。SSR分子标记是Saghai-Maroof等人首先用于大麦研究的,经过研究发展,现在SSR标记已被广泛运用于大麦、水稻、玉米等多种植物遗传多样性的研究。现已发展的大麦SSR 标记约700个, 已作图的微卫星标记约300个[12]。

2.材料与方法

2.1实验材料

实验材料:世界各地大麦品种277份,欧洲地区的大麦品种70份。

实验试剂:液氮、3% H2O2、十六烷基三甲基溴化铵(阳离子去污剂)、l氯仿、异丙醇、异戊醇、75%酒精、双蒸水(ddH2O)、氢氧化钠、四硼酸钠、过硫酸铵、丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺、2×Specific Taq Master Mix、2×Taq PCR Master Mix、硝酸银、5×TBE、4% PA、10%Ammonium persuifate、TEMED、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、硼酸、0.5mol/l EDTA、Loading buffer、DL2000 DNA  Marker、DM1001、甲醛、镊子、单蒸水。

实验器材:培养箱、2ml离心管、1.5ml离心管、量筒、烧杯、玻璃棒、搅拌仪、研磨仪、恒温水浴锅、烘箱、橡胶手套、记号笔、灭菌锅、冰箱、制胶模具、微波炉、离心机、电泳槽、PCR仪、镊子、移液枪、枪头、PCR板。

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