1.3测定项目与方法

1. 3. 1干重
105 ℃杀青30 min,70 ℃烘干至恒重,测定根系与地上部分干重。

1. 3. 2 元素含量的测定
准确称取0.5 g植物样品,加入 V(硝酸):V(双氧水)=4:1过夜,次日置于消煮炉中消煮,用火焰式原子吸收光谱仪测定Cd、Si、Ca、P、Mg含量。

1. 3.3 MDA、H2O2和O2.-含量的测定
分别准确称取0.3 g植物样,置于研钵中加入1 %三氯乙酸(TCA)3 ml,冰上研磨成匀浆转移至10 ml离心管中,12000 g离心15 min。
MDA含量的测定:取上清液0.5 ml于干净试管中加入1.5 ml 0.5 %硫代巴比妥酸(TBA),摇匀后,90 ℃水浴20 min,冷却至室温,以10000 g离心5 min,取上清测532、600、450 nm处的吸光值,单位以nmol•g-1FW表示。
H2O2含量的测定:取上清液0.5 ml于干净试管中加入0.5 ml 10 mmol/L PBS(PH=7.0)和1ml KI摇匀后,测390 nm处的吸光值。
O2.-含量的测定:采用王爱国等人的方法[8]。

1.3.3 抗氧化相关酶(SOD、CAT、APX)活性的测定
取0.5 g植物样,加5 ml酶提取液(0.1 mol/L,pH 7.0的磷酸缓冲液,20 mmol/L EDTA,10 % pvp,去离子水),冰浴研磨,4 ℃冷冻离心(12000 g, 15-20 min),取上清液。
SOD(超氧化物歧化酶):采用氯化硝基四氮唑蓝(NBT)光化还原法测定;
CAT(过氧化氢酶):取上清液100 ul,加入反应液(1.5 mL 0.1 mol/L PBS(PH=7.0),10 L 30 % H2O2,1390 L去离子水),测定240 nm处的吸光值。
APX(抗坏血酸过氧化物酶):取上清液50 L,加入反应液(1.5 mL 0.1mol/L PBS(PH=7.0),15 L 100 mmol/L ASA,30 L 30 % H2O2,1405 L去离子水),测定290 nm处的吸光值。
1. 4数据处理和作图
采用SPSS 13.0和Excel软件对实验数据进行方差分析和显著性测验。采用Sigma plot 10.0 作图。
上一篇:黄花月见草耐贫瘠性和氮磷钾肥最适用量研究
下一篇:外源L-抗坏血酸对Cr6+胁迫下小麦根际pH值和有机酸分泌的影响及其缓解机理研究

稻田锌含量对水稻害虫褐...

甲苯二甲苯对斑马鱼幼鱼神经的毒性影响

PEG6000模拟干旱胁迫对大麦...

教育实习前后生物专业师...

小鼠皮层PV+神经元fgfr2敲除对突触蛋白的影响

重金属铬对白尾灰蜻稚虫...

对二甲苯对视顶盖HDAC1蛋白表达的影响

神经外科重症监护病房患...

志愿者活动的调查问卷表

中国学术生态细节考察《...

医院财务风险因素分析及管理措施【2367字】

10万元能开儿童乐园吗,我...

承德市事业单位档案管理...

AT89C52单片机的超声波测距...

国内外图像分割技术研究现状

C#学校科研管理系统的设计

公寓空调设计任务书