异养氨氧化细菌的筛选+文献综述(6)
加入显色剂20min后、2h以内，在540nm的最大吸光度波长处，用光程长10mm 的比色皿，以实验用水做参比，测量溶液吸光度 。
c) 硝酸盐测定方法
取1mL试样加入到10mL比色管中，用去离子水标定至标线，加1.0mL盐酸溶液，0.1mL 氨基磺酸溶液于比色管中，用光程长10mm石英比色皿，在 220 和 275nm 波长处，以清水加1mL盐酸作参比，测量吸光度。
2.2.3生活污水中细菌的生长情况
将2μL菌液接种到装有3mL生活污水的试管内，放入30℃、150r/min的振荡培养箱内培养，分别在24h和48h时取样，梯度稀释涂平板计数。观察两种细菌在生活污水中的生长繁殖情况。
2.2.4生长曲线的测定
（1）牛肉膏蛋白胨培养基
牛肉膏3g，蛋白胨10 g，蒸馏水1000mL，Nacl 5g,pH7.0～7.2。
灭菌条件：0.103MPa,(121℃,15min～20min)。
固体培养基加1.5%～2.0%的琼脂。
（2）异氧硝化培养基
(NH4)2SO4 0.24g，琥珀酸钠2.81g，文氏盐50mL，溶解后用蒸馏水定容至1L（固体培养基则需加入2%）。
文氏盐溶液：K2HPO4•3H2O 6.5g，MgSO4•7H2O 2.5g，NaCl 2.5g，FeSO4•7H2O 0.05g，MnSO4•H2O 0.04g，溶解后用蒸馏水定容至1L。
（3）前期准备
在含TP和E.coli的液体培养基中各取10mL于两支离心管中，离心15min，转速为4000r/min，用0.9%生理盐水冲洗后，再加5mL的生理盐水离心15 min，转速为4000 r/min，离心后将菌倒入配好的异养硝化培养基中，放入摇床中培养，温度30℃，转速为120 r/min，培养36h。
（4）OD值的检测
每隔两小时，在波长为600nm处，用空白试样为参比，测其OD值，测完后，以时间为横坐标，OD值为纵坐标，绘制曲线。
2.2.5菌株异养硝化性能的研究
a)不同影响因素下菌株的异养硝化作用
(1)不同初始pH对菌株的异养硝化作用
配置不同PH值的异养硝化培养基50 mL，使pH分别为6.0，7.0，8.0，碳源为琥珀酸钠，其他培养基成分相同（与什么相同），分别接入TP和E.coli，接种量为5%，30℃，120r/min的条件下培养，振荡培养6h,24h后测定其氨氮的降解率。