1.2.2 溶剂体系选择方法

分配系数测定法：一般采用TLC法结合HPLC法，先通过TLC法大致测定目标化合物的位置，然后进HPLC，根据HPLC图谱分析其上下相峰面积比值以确定目标化合物的分配系数。选择分配系数在0.5-2之间的溶剂体系。

1.3 阔叶十大功劳

1.3.1阔叶十大功劳简介

阔叶十大功劳（Mahonia bealei）是小檗科Berberidaceae十大功劳属Mahoina植物，全株可入药，具有清热解毒、止咳化痰、清肿止泻、滋阴补阳等功效[29,30]，可用于治疗肺热、咳嗽、肠炎、痢疾、黄疸、目赤肿痛、胃火牙痛、 痈肿等等[31-33]。

1.3.2阔叶十大功劳的现代研究进展

现代研究进展表明，功劳木属植物具有抗菌[32]、抗肿瘤[33]、抗心律失常、消炎、降血糖等作用。根和茎可主治急性和慢性肝炎、细菌性痢疾、支气管炎等症；叶片能治疗肺结核和感冒，外用治眼结膜炎，烧烫伤等。茎皮可以提取黄连素。

2 仪器与材料

上海同田 TBE-300A 高速逆流色谱仪；Agilent 1260高效液相色谱仪；Millipore 纯水机（美国Millipore公司）。甲醇，乙醇等试剂均为分析纯。十大功劳叶于2015年9月购自贵州。

3 方法与结果来`自^优尔论*文-网www.youerw.com

3.1 HPLC条件

采用 Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18 色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 µm），流动相为水（A）—甲醇（B）溶液，梯度洗脱（0～5 min，20%B→30%B；5～6 min，30%B；6～28 min，30%B→48%B；28～40 min，48%B→70%B；40～42 min，70%B），流速200 µL/min，柱温30°C，检测波长254 nm，进样量10 L。

3.2 粗提物的准备

取事先制备好的十大功劳叶正丁醇萃取相溶于水中，经滤膜过滤，然后经5个洗脱梯度的D-101大孔吸附树脂洗脱：水，10%乙醇，30%乙醇，50%乙醇，70%乙醇，90%乙醇。将得到的不同浓度梯度的洗脱液旋转蒸干，分别用甲醇溶解。然后过膜稀释进HPLC，通过HPLC图谱分析发现目标化合物主要存在于30%乙醇溶液洗脱的洗脱液中