2材料与方法文献综述
2。1玉米BRXL基因的系统鉴定
从Pfam数据库(http://pfam。xfam。org/)下载BRXL结构域一致性序列,在玉米遗传学和基因组学数据库(MaizeGDB, http://www。maizegdb。org)中比对搜索,得到候选蛋白。搜索参数设置为E≤10-5。利用SMART工具对候选蛋白进行检索,若存在BRXL结构域,则认为属于BRXL家族。利用Protparam 软件(http://expasyorg/tools/ protparam。html)计算蛋白质等电点、氨基酸数目、分子量等参数,采用WoLF PSORT(http://www。genscript。com/psort/wolf_psort。html)预测蛋白质亚细胞定位。
2。2染色体分布和基因复制分析
根据玉米BRXL的座位信息,利用Mapchart软件绘制染色体分布图。通过检索植物基因组复制数据库(PGDD, http://chibba。agtec。uga。edu/duplication/index/locus)查找玉米BRXL的片段复制事件。若两个基因间隔不超过5个基因,则认为起源于串联重复。
2。3系统发育分析
利用MEGA 5。1软件对玉米BRXL进行多序列比对,采用邻接法构建系统发育树,Bootstrap重抽样进行了1000次。
2。4基因表达分析
通过检索PLEXdb数据库(http://www。plexdb。org/plex。php?database=Corn)获取玉米BRXL基因的芯片表达数据,利用ClUSTER3。0软件绘制基因表达热图。
3结果与分析来!自-优.尔,论:文+网www.youerw.com
3。1玉米基因组中的BRXL基因
通过在MaizeGDB数据库中检索,除去重复序列和不含完整BRXL结构域的序列,最终鉴定出玉米基因组中17个BRXL基因。根据染色体位置系统命名为ZmBRXL1~ZmBRXL17。ZmBRXL外显子数差别较大:最少的为ZmBRXL12,有2个外显子,最多的是ZmBRXL11,有22个外显子。蛋白质氨基酸数从127~1131不等。理论等电点为4。67~10。05,其中ZmBRXL1,ZmBRXL2,ZmBRXL5,ZmBRXL6,ZmBRX8,ZmBRX11,ZmBRX14为酸性蛋白,ZmBRXL12为近中性蛋白,其余为碱性蛋白。亚细胞定位分析表明,ZmBRXL主要分布在细胞核中,少数分布在线粒体和叶绿体内。