湖羊最初是从蒙古绵羊进化而来的,后来北方居民在迁移向南方时携带着蒙古绵羊,蒙古绵羊在南方太湖地区经过漫长的驯化和演变,就成了我们如今所见到的湖羊,湖羊同蒙古绵羊一样属于短脂尾,同时还具有与蒙古绵羊相近的耳大下垂,背腰平直,泌乳性能良好,繁殖性能强,公母都没有角等特点,这也进一步说明了湖羊和蒙古绵羊有着密切的关系,此外湖羊畏光、胆小、吃夜草、生长发育快、成熟早、四季发情、多胎高产。湖羊成年后体重可达到40公斤,这也使得大部分企业将湖羊转向了肉用的生产行业,2006年湖羊被农业部列入了畜禽遗传资源保护名录。
肌动蛋白(actin)广泛的存在于许多生物细胞中,其中在真核细胞中含量较多并且较为丰富,不仅如此,在肌细胞中的含量也相当可观,占总蛋白含量的10%以上,在非肌细胞中也占到1%~5%左右[1]。ACTA1(actin alpha 1),即骨骼肌α肌动蛋白, 是肌动蛋白的一种异构形式,它作为一种特殊的收缩蛋白,不仅在骨骼肌的活动中发挥着不可替代的作用,而且还广泛的参与了细肌丝组装、细胞及细胞器的运动以及骨骼肌纤维的发育[2]。国内外对此基因的研究很多,国外的研究主要集中于ACTA1基因的突变,研究表明ACTA1基因突变可导致三种不同的先天性肌病:肌动蛋白肌病(AM)[3,4,5]、核内杆肌病(IRM)[6,7],以及杆状体肌病(NEM)[8,9],这是ACTA1突变所引起的最常见的肌病形式[10,11]。而国内的研究从基因重组方面着手,主要成果是斑马鱼外源基因ACTA1-AcGFP重组,重组后所得到的序列有3个结合位点,其中的一个结合位点E-框能够和MyoD基因结合,以此来促进肌肉的生成,另一个结合位点MEF-2有助于肌肉特异性基因的激活[12]。从基因多态性与动物体尺性状相关性方面着手研究,主要成果是槟榔江水牛ACTA1基因多态性与生长性状的相关性[13],张斌等人通过研究发现ACTA1基因突变后,对于槟榔江水牛的各项发育指标都有显著地影响,同时在这之前田万年[1]等人也研究了延边黄牛ACTA1基因多态性,很好地分析了基因多态性与黄牛体高、体长、体重、胸围等体尺性状的相关性,并发现ACTA1基因的突变与延边黄牛体高、体长、体重、胸围等体尺性状存在显著相关,他们的研究对于槟榔江水牛、黄牛等动物的培育起了很重要的作用,使人们可以更好地去培育新品种。从资料显示来看,目前国内外还没有针对于ACTA1基因与湖羊生长发育、生产性状的相关性研究,因此本实验将从这方面着手,主要研究湖羊ACTA1基因遗传多样性及其与湖羊体尺性状的相关性。来*自-优=尔,论:文+网www.youerw.com
2 材料和方法
2.1 实验过程
DNA提取→琼脂糖凝胶电泳→DNA浓度和纯度测定→PCR扩增→PCR—SSCP检测→DNA测序→数据分析→结论总结→论文书写与修改
2.2 实验材料
2.2.1 实验样品来源
实验所用的材料是湖羊的耳朵组织块,从湖羊的不同个体中剪取小部分耳朵组织块,编号并放入酒精溶液中,而后带回实验室放入-70℃冰箱中保存。
2.2.2 实验器材设备
实验过程较为复杂,因此所使用到的仪器设备也比较多