蒸馏水                                                  加至100 ml

溶液二:白细胞稀释液(过滤后备用)

冰醋酸               (破坏红细胞)                            2。0 ml

1 %龙胆紫或1 %美蓝    (染白细胞核呈淡蓝色,以便相识)        1。0 ml

蒸馏水                                                 加至100 ml

溶液三:血小板稀释液

尿素                (维持渗透压)                            10~13 g

柠檬酸钠            (防止血小板凝集)                          0。5 g

40 %甲醛溶液        (防腐)                                    0。1 ml

蒸馏水                                                  加至100 ml

溶液四:1 %HCl溶液

3  方法

3。1  仪器及试剂的准备

将实验所用仪器进行彻底的清洗、干燥,备用。用清洁的实验仪器分别配制1 %盐酸250 ml,配制红细胞稀释液、白细胞稀释液、血小板稀释液各200 ml。

3。2  血样采集及准备

实验采用尾部采血法,将一部分血液盛在加有肝素(肝素可阻止血中的凝血酶元转变为凝血酶,防止凝血,适用于血液有机、无机成分的分析)的小烧杯中,边采血变亲亲摇匀,防止血液凝固,用于测定血红蛋白含量和红细胞抵抗力。将另一部分血液盛在小烧杯中,然后迅速用装有柠檬酸钠的注射器将柠檬酸钠和血液以1:4的比例抽取血液,抽取后充分均匀,但要轻柔,以防发生溶血。

3。3  测定指标

红细胞数量测定:用一次性取血管准确吸取血液10 ul,擦净管外沾染血液,插入加有3。99 ml红细胞稀释液试管中,用上清液清洗毛细血管2~3次,轻轻摇动试管1~2 min,使血液与稀释液充分均匀。用洁净玻璃棒蘸取少量已稀释混匀后的血细胞悬浮液,滴入血细胞计数板的计数室内,使之灌满,静置2~3 min后,待细胞下沉后进行记数。把计数室中央的大方格置于视野中,转用高倍镜,计数5个中方格内的红细胞总数。计数时必须遵循一定方向逐格进行,如将左侧和上侧线上的细胞计入,则勿将右侧和下侧线上的细胞计入。来*自-优=尔,论:文+网www.youerw.com

白细胞数量测定:用一次性取血管准确吸取血液20 ul,擦净管外沾染血液,插入加有0。38 ml白细胞稀释液试管中,用上清液清洗毛细血管2~3次,轻轻摇动试管1~2 min,使血液与稀释液充分均匀。用洁净玻璃棒蘸取少量已稀释混匀后的血细胞悬浮液,滴入血细胞计数板的计数室内,使之灌满,静置2~3 min后,待细胞下沉后进行记数。

血红蛋白含量的测定:用滴管加0。1 mol/L盐酸至下方刻度2处,用血红蛋白吸管吸取血液至20 ul处,用脱脂棉仔细除去吸管处的血液。将血液吹吸干净后静置10 min,然后滴加纯化水,同时进行比色,直至溶液的颜色与标准比色板的颜色相同为止。读出管内液面所在的刻度,记录血红蛋白的绝对值,即为100 ml血液中所含血红蛋白的质量(g/dL)

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