然后用Nanodrop法测量回收的DNA浓度。其方法步骤为:打开电脑,选择Nanodrop2000程序软件,待初始化完成后选择“Nuclear acid”,再初始化。在仪器的加样处加入3µL TE Buffer,洗涤。再加入1。5ml TE Buffer合上盖子。点击“Blank”选项,进行校零。用纸轻轻吸干样品孔的TE buffer,再加入1µL待测DNA溶液,盒盖,点击“Measure”电脑即可生成测量结果(绿色框中),观察DNA纯度。来*自-优=尔,论:文+网www.youerw.com
4、 Pact的扩增
(1) 引物设计
根据Pact的DNA片段序列,设计引物为cel1a-Act-R和XbaI-F,XbaI-F的引物序列是TATATATATCTAGAC ACAGCAGAAGGGGGTTCCGTCAAC。其中波浪线标记基因是XbaI限制性内切酶的识别位点。cel1a-Act-R的引物序列是GGGCAGCATTGTGACTGATT AATGTATGAAGCTGATGAAAG。其中波浪线标记基因是cel1a的基因,下划直线为Pact的基因序列。引物cel1a-Act-R和XbaI-F均为赛百盛基因技术有限公司合成。