图2 LYG16菌株革兰氏染色显微图 5
图3 LYG16菌株电镜细胞形态 6
图4 PCR结果检测图 8
图5 LYG16菌株系统发育树 11
图6 pH值对LYG16菌株的生长的影响 12
图7 温度对LYG16菌株的生长的影响 13
图8 盐浓度对LYG16菌株的生长的影响 14
表清单
表序号 表名称 页码
表1 PCR试剂使用配方 3
表2 PCR条件设置 3
表3 分离菌株LYG16与深海海旋菌属相近种的生理生化特性比较 7
表4 菌株LYG16的16S rDNA序列同源性比较 9
引言
多环芳香烃化合物(polycyclic Aromatic Hydrocarbons,PAHs)是一类由两个或两个以上的苯环以线性、角状或者簇聚等不同方式排列形成的碳氢有机化合物[1]。PAHs污染物在环境介质中广泛存在,是自然活动和人类活动中有机物的不完全燃烧或高温裂解的副产物[2]。多数PAHs为有毒物质,很多甚至有三致效应,即致癌、致畸变和致突变[3],而且由于PAHs诸多特性,如低水溶解性、亲脂性、难降解性、遗传毒性,使得PAHs能够在环境中长期存在,并且富集于生物体中,对自然界生物安全和人类健康安全构成严重威胁[4]。当前,有许多国家,包括我国已经将其列入优先控制的污染物[5]。因此,能够有效地降解多环芳烃具有重要的理论和现实意义。
随着对PAHs降解研究的不断深入,了解小分子PAHs一般可以直接被微生物降解,而三环以上的高分子PAHs则可利用微生物的共代谢进行降解[6]。而且。通常情况下,PAHs的环数越多,生物毒性越高[7],越难被微生物降解利用[8]。而PAHs 的污染通常伴随着盐环境[9],而盐环境下的PAHs更难被降解。目前已经发现,并报道的降解多环芳烃菌种中,多集中在假单胞菌属(Pseudomonas)、分枝杆菌(Mycobacterium)芽孢杆菌属(Bacillus)等[10]耐盐性较低的菌属。而深海海旋菌属具有较大的耐盐范围。科学家们发现深海海旋菌能够降解PAHs的价值时较晚,Lopez-Lopez[11]等人于2002年首次分离出深海海旋菌属。发现并报道能够降解PAHs的深海海旋菌只有海旋菌Thalassospira tepidipHila sp。nov。1-1B(T) [12]和Thalassospira xianhensis sp。nov。P-4(T) [13] 可见,对能够降解多环芳烃的深海海旋菌属有效了解仍然相对匮乏。文献综述
本实验从连云港海域海水,以萘作为唯一碳源,分离出菌株LYG16能够利用萘,经过鉴定它属于深海海旋菌属(Thalassospira tepidiphila)。并对其生长特性和生理生化特性进行研究,为深海海旋菌降解PAHs研究提供理论基础。
1。材料和方法
1。1 实验材料
1。1。1 菌株来源
取自连云港海域海水,海拔0米,东经119。66°,北纬34。59°,用灭菌的玻璃广口瓶,和灭菌的吸管吸取海水,一部分作为原液保留,一部分用于实验研究。
1。1。2 培养基