1。3。3 茎部内生真菌发酵产物抑菌实验 10

1。3。3。1 发酵液初提 10

1。3。3。2发酵液萃取浓缩 10

1。3。3。3 抑菌实验 11

2 结果与分析 11

2。1茎部内生真菌分离纯化结果 11

2。2茎部内生真菌鉴定结果 12

2。3 指示病原菌的筛选 15

2。4 最佳抑菌菌株发酵产物抑菌浓度的选择 16

3  讨论 17

3。1不同的培养环境对内生真菌生长的影响 18

参考文献： 18

致谢 19

引言

1。1药用植物内生真菌的发酵产物来自优Q尔W论E文R网wWw.YouERw.com 加QQ75201.8766

    植物内生真菌(Endophytic fungus)是指在一定的生长阶段或全部生长阶段存在于健康生长植物组织器官内的真菌，其能够产生结构形态较为新颖、功能作用特殊的初级发酵产物和次级发酵产物。内生真菌周期性的生活在植物体内，大多与宿主植物形成了互利互惠的生存关系：一方面，植物为其内生真菌提供矿物质和光合产物；另一个方面，内生真菌产生的发酵产物，或许能够提高宿主植物对于生物胁迫或者非生物胁迫的抵抗能力，不仅如此，这些发酵产物对于宿主植物的生长发育有着重要影响。对植物内生真菌发酵产物的研究已经成为微生物开发的一个重要领域，目前研究发现，这类发酵产物在抑菌、抗肿瘤、杀虫、免疫抑制、降血糖方面有着潜在的应用空间。相较于植株自身，内生真菌产生的发酵产物在应用方面不会受到季节、地域的限制，而且容易控制其产量,在农业的生物防治、医药、工业方面有着广阔的潜在应用前景。论文网

1。2飞蓬草茎部内生真菌发酵产物的研究现状

飞蓬草（Erigeron annuus）属于菊科飞蓬属，是一年生或多年生的草本植物。其本属植物达到250种，我国有近30种，主要分布在南北各省。飞蓬草常生于山坡、草地或者牧场，性耐寒，喜向阳，在土壤疏松、肥沃、湿润而排水良好的地方生长良好。飞蓬草作为一种药用植物，可以产生香草酸、丁香酸、柠檬烯等具有抑菌作用的发酵产物，并且有扩张心脑血管、降血脂、改善微循环等的作用[16]。由于飞蓬草具有广泛的药理活性，其茎部的内生真菌可能含有新颖独特的发酵产物，因而本次试验对于飞蓬草茎部内生真菌展开了一系列实验。

目前对飞蓬草的研究主要集中在除草活性研究和生物活性研究等方面，停留在研究药用植物植株本身，对于其各个部位的内生真菌的分离、鉴定以及发酵产物的研究还比较少。本次试验通过对飞蓬草茎部内生真菌的分离鉴定及体外抗菌实验的研究，探究茎部内生真菌的最佳指示病原菌，发酵产物的最佳抑菌浓度，为飞蓬草其他部位内生真菌的分离提供一定的参考。

1。3内生真菌抑菌研究

1。3。1平板打洞法

采用平板打洞法测定内生真菌的抑菌活性是将指示病原菌制成一定浓度的菌悬液后，将其均匀的涂布于PDA培养基上，然后用一定规格的打孔器打孔，打出孔的距离要两两保持一致。接着吸取一定量的供试植物内生真菌发酵液滴入打出的孔中，在37℃恒温培养箱中培养7-8h后，采用十字交叉法测其抑菌圈直径，取其平均值为抑菌圈大小。