1实验部分
1.1实验仪器及试剂
1.1.1实验试剂
硼砂(河南焦作市化工三厂,分析纯)、柠檬酸(天津市化学试剂六厂三分厂,分析纯)、磷酸氢二钠(天津市福晨化学试剂厂,分析纯)、盐酸(洛阳市化学试剂厂,分析纯)、乙酸(开封市芳晶化学试剂有限公司,分析纯)、乙酸锌(天津市凯通化学试剂有限公司,分析纯)、对苯胺磺酸(中国医药上海化学试剂公司,分析纯)、萘乙二胺盐酸盐(天津市科密欧化学试剂有限公司,分析纯)、亚硝酸钠(天津市福晨化学试剂厂,分析纯)、亚铁氰化钾(天津市福晨化学试剂厂,分析纯)。
1.1.2实验药品
九阳料理机(山东九阳家电有限公司)、低速离心机(安徽中科中佳科学仪器有限公司)、水浴锅(巩义市予华仪器有限公司)、电子万用炉(北京市永光明医疗仪器厂)、可见分光光度计(上海棱光技术有限公司)、pH计(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)、电子分析天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)。
1.1.3样品
洋葱、台式小烤肠(金锣)、金双汇(双汇)、马可波罗火腿肠(双汇,无淀粉)、金品王(双汇)、劲火腿(双汇)、泡面拍档(双汇)。
1.2样品的处理
1.2.1洋葱处理
将洋葱洗净,切块,然后将其放入九阳榨汁机中搅拌,制成匀浆,接着将此匀浆放入低速离心机中,以4000 r/min的转速离心,10 min后,取上层清液,滤纸过滤,弃初滤液20 mL,将清液转移到容量瓶中。保存待用。
1.2.2火腿肠的处理
将6种样品全部绞碎,然后分别称取5.0013 g台式小烤肠、 5.0029 g金双汇、5.0067 g马可波罗火腿肠、5.0046 g金品王、5.0030 g劲火腿、5.0404 g泡面拍档样品。分别编号为1、2、3、4、5、6,然后分别转移到50 mL烧杯中,加入12.5 mL饱和硼酸钠溶液,接着用70 ℃的蒸馏水将其转移至250 mL 容量瓶里,置于沸水浴中大约15 min,继而冷却到室温,接着添加亚铁氰化钾溶液5 mL,摇匀,接着加5 mL的乙酸锌溶液,目的是为了让蛋白质析出。定容摇匀,静置1 h,除表层的油脂,过滤清液,继而弃初得滤液20 mL,编号储存。
1.3实验原理
样品析出蛋白质、除去脂肪后,弱酸条件下,亚硝酸盐和对苯胺磺酸发生重氮化反应,生成重氮盐,此重氮盐再与萘乙二胺盐酸盐偶合形成紫红色染料,染料颜色深浅与亚硝酸根含量成正比,最大吸收波长处测其吸光度。
1.4亚硝酸盐清除率的测定
准确吸取5.41 µg/mL亚硝酸盐溶液5.0 mL,置于比色管中,加6.0 mL洋葱浸提液,用乙酸调pH值为1.00,摇匀,静置10 min,加入2.0 mL对氨基苯磺酸溶液,静置4 min,再加入1.0 mL的盐酸萘乙二胺溶液,定容。以空白溶液作参比,在波长540 nm处测定吸光度,计算亚硝酸盐的清除率。洋葱提取液对亚硝酸盐的清除率公式:
CL=(A1-A2)/A1
式中:CL为清除率(%),A1 为未加洋葱提取液时亚硝酸盐溶液的吸光度, A2 为加洋葱提取液时后亚硝酸盐溶液的吸光度。测得洋葱提取液对亚硝酸盐的清除率为42.15 %。