-
摘要：本实验采用高效液相色谱法测定了面粉中的维生素B1，B2，B6 及烟酰胺的含量，面粉中的维生素用 0.5mol/L 的 HCl 提取，使用 Kromasil C18 柱（150*4.6mm ），流速为 1.3 ml/min，实验以乙腈-0.1%三氟乙酸溶液作为流动相，采用梯度洗脱，设定 250nm（VB1）、260nm（烟酰胺）、270nm（VB2）、290nm（VB6）四个不同的紫外检测波长，得到面粉样品中VB1、VB2、VB6 和烟酰胺的检出限分别为 0.7μg/g、0.2μg/g、0.9μg/g 和 0.7μg/g。得实验所测的面粉VB2 和烟酰胺均低于最小检测限，VB1 含量为 6.58-11.20ppm，VB6 含量为4.72-10.60ppm。56995
- 上一篇：香辛料精油结合环状糊精对几种细菌的抑菌效果研究
- 下一篇：餐饮业中的食品添加剂与食品安全
毕业论文关键词：维生素；核黄素；吡哆醇；硫胺素；烟酰胺；高效液相色谱法
The determination of vitamin content in flour andflour product by HPLCAbstract： This experiment is intended to determine the content of thiamine，riboflavin，pyridoxine and Nictinamide by HPLC . The vitamin in the flour isextracted by 0.5mol/L HCl.This experiment uses the Kromasil C18 column.Velocityof flow is 1.3ml/min. The mobile phase is acetonitrile-0.1%TFA,gradientlyeluting,setting four different wave length of detection: 250nm（VB1）、260nm（Nictinamide）、270nm（VB2）and 290nm（VB6）. The lower limit of detectionof VB1、VB2、VB6 and Nictinamide in flour are repectively 0.7μg/g、0.2μg/g、0.9μg/g and 0.07μg/g .The content of VB2 and nicotinamide are lower than theminimum detection limit in the flour,the content of VB1 ranges from 6.58 to11.20ppm,the content of VB2 ranges from 4.72 to 10.60 ppm.
Keyword：VB;HPLC;Thiamine；Riboflavin；Pyridoxine；Nictinamide
目录
1 前言 5
1.1 选题意义.... 5
1.2 文献进展状况.6
1.2.1 维生素简介...6
1.2.2 高效液相色谱法原理.6
1.2.3 固相萃取的步骤及应用..7
1.2.4 样品中单种水溶性维生素的测定8
1.2.5 样品中多种维生素的同时测定....9
2 实验部分6
2.1 仪器与试剂.11
2.1.1 仪器.11
2.1.2 试剂.11
2.1.3 样品... 11
2.2 维生素标准储备液的配制...12
2.3 样品前处理... 12
2.4 高效液相色谱仪操作步骤...12
2.5 高效液相色谱条件 12
3 结果与讨论....13
3.1测定条件考察13
3.1.1预处理条件的考察....13
3.1.2 HPLC条件的考察.14
3.2方法论证... 15
3.2.1保留时间的判定... 15
3.2.2重复性16
3.2.3标准曲线的绘制... 16
3.2.4 回收率测定 17
3.2.5 样品测定结果. 18
3.2.6 实验结果讨论. 19
4 结论21
致谢...22
主要参考文献.23
1 前言1.1 选题意义水溶性维生素在人体生命活动中扮演着相当重要的角色， 水溶性维生素中又以维生素B 和维生素C 较为重要， 本课题旨在分析测定日常食物—面粉及面粉制品中水溶性维生素的含量。高效液相色谱法的特点在于高灵敏度，高选择性的特点，也可用于微量组分的测定， 基于高效液相色谱法的这些优势条件， 通过维生素标准品测试优化HPLC测定水溶性维生素的条件，然后再进行同时测定面粉中的水溶性维生素B1，B2，B6和的含量。市面上的面粉制品种类繁多，本实验通过对其中水溶性维生素的含量测定，并同国家标准进行比较， 讨论出人们可以更加好的补充人体所需的水溶性维生素的面粉制品。
1.2 文献进展状况1.2.1 维生素简介维生素是人体从食物中可以获得的微量物质， 它的功能主要是维持正常的生理功能， 维生素也在生长代谢过程中及发育过程中发挥着不可或缺举足轻重的作用。但是，维生素不参加人体细胞的形成，同时也不供给能量。面粉中的维生素包含VB，VC，VD 和VE。VB主要有 VB1，VB2，VPP、VB6、生物素、叶酸及 VB12。维生素B1，又称作硫胺素，是最开始就被人发现的维生素中的一种。呈白色晶体，容易被氧化产生脱氢硫胺素当有强化剂存在的情况下，脱氢硫胺素在有紫外光照射时呈现蓝色荧光。有微弱的臭，苦，露置在空气中时，容易吸收水分。VB1大部分介入于碳水化合物的代谢过程中，另外，它同时增添食欲、参加糖类代谢过程和对神经系统功能的维护等作用[1]。维生素 B2，又称核黄素，在水溶液中微溶，在中性以及酸性的溶液中，对其加热是稳定的。它的主要功能是构成黄酶的辅酶，参加物质代谢中的氢传递。缺乏维生素B2 的时候会引起代谢的紊乱，引发舌炎，口角炎以及口腔溃疡的症状等[2]。维生素 B6，又被称作为吡哆素，它主要包含吡哆醇、吡哆醛以及吡哆胺，以磷酸酯的形式存在于体内，在水溶液中易溶解，会被光或者碱性溶液破坏，不耐高温。维生素 B6的重要作用是体内某一些辅酶的组成部分，参加许多代谢的反应，特别是和氨基酸的代谢过程有着紧密的联系。在医学上把维生素 B6用于制作治疗妊娠性呕吐和放射病呕吐的药剂。[2]1.2.2高效液相色谱法原理按照固定相的特性可以把高效液相色谱分成高效凝胶色谱， 疏水性高效液相色谱，反相高效液相色谱，高效离子交换液相色谱，高效亲和液相色谱和高效聚焦液相色谱等， 分离或解析各种不同化合物的原理大多与相对应的普通液相层析的原理相似，不一样的地方是高效液相色谱相对较敏感、迅速、大分辨率、高重复性，另外一定要在色谱仪中进行实验。高效液相色谱仪主要有进样，输液，分离，检测和数据处理系统[3]a进样系统进样操作大多使用隔膜注射进样器或高压进样来完成，进样的量是不变的。重复性会大大提高在样品分析过程中。b输液系统主要由高压泵，流动相贮存器和梯度仪组成。c分离系统由色谱柱，连接管以及恒温器组成。色谱柱一般长度为10～50cmd检测系统仪器中经常使用的检测器有紫外检测器，示差折光检测器以及荧光检测器。e数据处理系统主要对测试的数据进行收集，储存，显示，打印及处理操作，基于此才能对样品的分离、制备或者鉴定进行进一步的操作。