壳聚糖加工成的壳寡糖,是壳聚糖类产品的升华版本,比壳聚糖多出许多优点,利用先进的生物方法加工的壳寡糖分子量低,水溶性好,生物活性高,天然,无辐射,无污染[4]。

     利用独有的微波物理方法把高分子的壳聚糖加工成低分子且水溶性的壳寡糖。在基因工程,蛋白质工程之后的被称为第三代生物技术的一种崭新技术,在医药,食品,农业,化工,能源,环保皆可以应用[5]。列如壳寡糖对人体有免疫调节的作用,能够拮抗肿瘤,降血压,调节血糖平衡,改善人体各个器官的生理功能的优点[6]。其次,壳寡糖可以促进消化道里的益生菌的活化,加强维生素和矿物质的吸收,可以广泛应用在修身减脂,美容美颜等饮食中,还可以作为保鲜膜的作用,具有通透,防水,防菌,抗腐等特点[7]。在我们的日常生活方面,壳寡糖也将扮演重要的角色,壳寡糖有保持皮肤水润的作用,可以活化机体的细胞,延缓皮肤的衰老,对皮肤上的有害病菌有抑制作用[8],对头皮来讲,不仅可以去屑止痒,还可以使头皮湿润易梳理防灰尘,可开发一些生物护肤品[9]。在饲料方面,壳寡糖无毒性,没有热源,稳定性高,可调节动物消化道里微生物的生长代谢,促进有益菌的生长减少脂肪,增强免疫力[10]。文献综述

     在农业上壳寡糖的作用更是妙不可言,它可以让土壤里的菌种发生变化,能增加或减少某些菌种的数量,以此可以让植物健康的生长,减少一些病毒、真菌、细菌对农作物的侵害[11]。对一些常见的农作物病菌具有不错的防治作用,可研发为生物农药,植物的调节剂等[12]。研究发现,壳聚糖对于一些植物及作物的常见病症都有良好的抑制及防治作用[13]。但壳寡糖的抑菌性能受多种因素的影响,对不同菌株的抑菌性能也存在较大差别。因此有必要采用壳寡糖样品对本实验室保存的几株植物病原真菌进行抑菌活性筛选。本实验着重于食品级824号壳寡糖对植物病原真菌的抑制性的研究,对壳寡糖的进一步了解提供了理论依据。

1材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1菌种:西瓜枯萎病菌(Fusarium wilt)、稻绿核病菌(Ustilaginoidea virens )西瓜壳二孢(Ascochyta citrullina)、水稻纹枯病菌(Rhizoctorzia solani)

1.1.2培养基:土豆葡萄糖琼脂培养基(Potato dextrose agar medium)

1.1.3试剂:824号壳寡糖

1.1.4仪器:高压灭菌锅,恒温培养箱,血球计数板,显微镜,电磁炉,烘干箱等

1.2实验方法

1.2.1  824号壳寡糖对水稻纹枯病菌的菌丝生长和分生孢子产孢量的影响

    配制PDA和含壳寡糖的PDA培养基:

    称取100 g土豆削皮切块放入电磁炉,烧杯量取500 mL蒸馏水倒入电磁炉,煮沸至土豆变软且可被玻璃棒戳破,称取10 g葡萄糖放入烧杯中,4个锥形瓶分别加入1.35 g琼脂粉,将煮好的土豆汤经双层纱布过滤到烧杯中,用玻璃棒搅拌至葡萄糖溶解并定容至500 mL,锥形瓶分别标号,1号瓶90 mL PDA,2号瓶87 mL PDA+3 mL 824号壳寡糖,3号瓶84 mL PDA+6 mL 824号壳寡糖,4号瓶78 mL PDA+12 mL 824号壳寡糖,然后,加塞,包扎,和包好的培养皿一起放在灭菌锅在121 ℃灭菌30 min,冷却后倒平板。来!自~优尔论-文|网www.youerw.com

用直径为6 mm的打孔器在水稻纹枯病菌菌落边缘打孔并取得圆状菌块,然后慢慢挑起圆状菌块,将有菌丝的一面与培养基的中央接触,每组接4个,接完后放入保鲜袋系好,放在培养箱等待观察。

    每天以十字交叉法去观察,测量并记录水稻纹枯病菌的菌落生长直径,观察菌落生长形态和疏密度等特征,直至有一组先长满培养基,如果10 d没有长满的,以第10 d的数据为准,吸取5 mL的无菌水冲洗培养好的病原真菌,取得带有孢子的悬浮液,再吸取5 μL悬浮液于血球计数板并观察记录数据,得出不同浓度824号壳寡糖培养基的分生孢子数量。 

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