称取毛豆荚粉末4.00g,按料液比1:20g/ml加入浓度为60%的乙醇水溶液,微波功率分别设置为600w,60℃下分别提取5min、10min、30min、50min、70min,抽滤,收集滤液,旋转蒸发浓缩,用水饱和正丁醇溶液和氨溶液进行分液萃取,再旋转蒸发至干,最后用分光光度法测定皂苷含量。
1.2.6 响应曲面试验
根据上述单因素试验的结果,以毛豆荚总皂苷提取率为指标,每个因素(乙醇体积分数、料液比、提取时间、微波温度)选取三个水平,设计四因素三水平的响应曲面实验,根据响应曲面实验结果确定毛豆荚总皂苷的最佳提取工艺 [10]。
2 结果与分析
2.1 标准曲线制作
2.1.1 标准曲线方程
将齐墩果酸标准液进行全波扫描,经试验可得在556nm-564nm范围内均有最大吸收,因此选择560nm为最大吸收波长按照1.2.2节方法进行操作并显色,以齐墩果酸浓度X(mg/mL)为横坐标、吸光度A 为纵坐标,经线性回归分析得回归方程为A=1.5794x-0.0058 (R2=0.9977)。