在实验过程中,我们也可以通过更换检测器,对油脂进行检测,如Cam-Chi Ngo-Duy[15]等以伞形科植物种子为样品,先将种子研磨,然后用索格利特装置用己烷将油脂从中萃取出来,经处理得到的样品溶液,然后溶于癸烷制成1.0μL的溶液。他使用气相色谱(毛细管柱RTX-65-TG; 30 m×0.25 mm i.d., 膜厚度 0.10 μm,固定相65% 苯甲基硅酮,分流比1:50 ),并使用火焰离子检测器。注射温度与检测温度均为400ºC,柱温:250ºC 1.5ºC/min 350ºC 0.5ºC/min 360ºC(3.33min)。载气为氢气,流量:0.6 mL/min,250ºC。其结果显示,使用火焰离子检测器也能很好的将各种甘油三酯鉴别出来。在 caraway,carrot,celery和parsley种子油脂肪酸中含量最多的是UUU(三不饱和甘油三酯)。Celery和parsley种子油脂肪酸中含量较高的依次为PsPsPs,LPsPs和OPsPs;carrot中有所不同为PsPsPs,OPsPs和LPsPs;而在caraway中差异较大,含量最高的为LPsPs,然后为LOPs,PsPsPs和OPsPs。
Lísa,M.[14]等同样使用气相色谱法,火焰离子检测器对动物脂肪进行检测。他们以动物(如鹿,羊,野生野猪等)脂肪组织为原料,浸入20mL的己烷10min后,经过滤和蒸馏后得到纯净的动物脂肪,然后取5mg脂肪和1mL 0.25M甲醇钠于甲醇中在65ºC水浴中加热10min,然后用己烷将得到的FAMEs萃取出来得到最终的样品溶液。然后使用气相色谱(30m×0.25m ID×0.25μm,固定相70% 氰丙基多硅伸苯树脂-硅氧烷)以及火焰离子检测器对样品进行检验。进样量为1μL,分流比1:15,载气为氮气,流量:1.3mL/min。注射温度和检测温度均为250ºC,柱温:140ºC 4ºC/min 235ºC。其结果显示,由于酰基链长度和双键个数的增加,脂肪酸甲酯的保留时间也随之增加;第二个双键与第一个双键之间的距离越长,FAMEs的保留时间也会变长。
2) 气相色谱直接分析
Karel Stránský[16]等以黑加仑种子为原材料,分别将样品室温下放置4星期,6ºC下放置14个月,室温下放置14个月,室温下放置10年,经萃取得到样品溶液。然后使用气相色谱(熔融石英柱DB-WAX,30m ×0.25 mm ×0.25μm)进行测定。分析条件:注射口温度240ºC,检测器温度250ºC,柱温:140ºC(0 min)5ºC/min 230ºC(25min)。载气为氢气,流量为46.2cm/s,140ºC,分流比40:1。该文对油酸[(9Z)- 十八碳-9 - 烯酸;18:1],亚油酸[(9Z,12Z) - 十八碳-9,12 - 二烯酸;18:2 ],c-亚麻酸[(6Z,9Z,12Z) - 十八碳-6,9,12 - 三酸,18:3],α-亚麻酸[(9Z,12Z,15Z) - 十八碳-9,12,15 - 三烯酸;18:3]等脂肪酸在不同黑加仑种子油中的含量进行了测定。对不同时期的油中的脂肪酸含量差距进行了比较。
参考文献
[1]袁小武,邓泽元,李静,范亚苇.胰脂肪酶法测定食用油甘油三酯中脂肪酸的位置分布.食品科学,2008, Vol. 29, No. 11,544-547
[2]赵海珍,陆兆新,别小妹,吕凤霞.高效液相色谱法测定猪油甘油三酯中的脂肪酸位置分布.色谱Chinese Journal of Chromatography,2005.3,Vol.23,No.2, 142-145
[3]Komoda,M., Ishikawa,O., Inoue,M., Hatanaka,H., Hattori,T., Satoh,C., Murakami,C., Yamada,K. and Tsutsumi,T. Quantitative determination of polymerized triacylglycerols in frying oils and fats by size exclusion chromatography: a collaborative study. J. Oleo Sci., 54, 529-536 (2005).
[4]何美玉编,现代有机与生物质谱。北京大学出版社,2002,138-139
[5]Cristina Ruiz-Samblás, Luis Cuadros-Rodríguez, Antonio González-Casado, Francisco de Paula Rodríguez García & Paulina de la Mata-Espinosa, Juan Manuel Bosque-Sendra. Multivariate analysis of HT/GC-(IT)MS chromatographic profiles of triacylglycerol for classification of olive oil varieties. Anal Bioanal Chem (2011) 399 : 2093–2103
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