毕业论文关键词：Egr-1基因；载体构建；pEGFP-Egr-1重组质粒；HepG2细胞；肝癌

Keyword: Egr-1 gene; vector construction; pEGFP-Egr-1 recombinant plasmid; HepG2 cells; liver cancer

目    录

引言 5

1 材料与源Q于D优G尔X论V文Y网wwW.yOueRw.com 原文+QQ75201`8766 方法 6

1。1 主要实验材料与试剂 6

1。2 实验仪器 6

1。3 方法 6

1。3。1 细胞的复苏、培养及冻存 6

1。3。2 细胞处理 7

1。3。3 Trizol法提总RNA 7

1。3。4 第一链cDNA合成 8

1。3。5 Egr-1基因CDS区片段的获得 8

1。3。6 Egr-1基因外来过表达质粒构建 8

1。3。7 细胞转染建立稳定细胞系 8

1。3。8 构建的重组质粒在HepG2细胞中表达检测 9

1。3。9 转染细胞Egr-1基因mRNA水平检测 9

1。3。10 转染细胞增殖影响检测 9

2 结果与分析 10

2。1 培养的人肝癌HepG2细胞 10

2。2 Egr-1基因外来过表达质粒构建 10

2。3 构建的质粒在HepG2细胞中的表达检测 11

2。4 经转染的HepG2细胞增殖影响的检测 13

3 讨论 13

参考文献 14

致谢 15

引言

肿瘤（tumor）可分为良性和恶性两大类，是机体在各种致癌因素作用下，有些组织的细胞失去了机体对其的正常调控而失调，，导致其进行了无限的恶性增殖形成肿块。癌症是上皮组织恶性肿瘤中的一种。根据Siegel RL等人在2016年进行的癌症统计，癌症是目前导致死亡的主要原因之一，而肝癌、胰腺癌、子宫体癌导致的患者死亡率上升[1]。癌症对人们的伤害是巨大的，然而现在却还没有特别有效的手段来根治癌症。From优T尔K论M文L网wWw.YouERw.com 加QQ75201^8766

恶性肿瘤的传统治疗方式如手术、放疗、化疗等对人体损伤危害大，如脱发、身体衰弱、器官受损等。而近年来，生物治疗和中医中药联合治疗成为癌症治疗的另外模式，因其副作用小而逐渐成为研究的热点。

姜黄为国人常用的一种主要成分为姜黄素的中药。姜黄素类具有降血脂、抗癌等对机体十分有好处的作用。近年来研究发现，姜黄素在抗肿瘤中具有一定作用，有研究报道发现姜黄素可能通过影响细胞周期进程来抑制癌细胞增殖，且可能涉及到多基因及多信号通路的相互作用，体现在细胞凋亡、自身免疫、代谢等方面[2]，它能通过诱导恶性肿瘤细胞分化、诱导肿瘤细胞凋亡及对肿瘤生长各期的抑制效应来发挥其抗癌作用[3]，临床应用十分广泛。