1。2。3胶体金免疫层析技术材料选择与制备

1。2。3。1硝酸纤维素膜的选择与制备

硝酸纤维素膜又称为NC膜，是胶体金免疫层析技术中最重要的部分之一，其免疫相关反应就发生在硝酸纤维素膜上，反应结果观察的C-line和T-line也是在硝酸纤维素膜上体现的。

因此，做实验前的准备首先就是对硝酸纤维素膜进行评估。硝酸纤维素膜的性能包括物理特性及其功能性。

物理特性包括NC膜的吸附性，孔径大小，厚度等等。跑水性能检测是目前备受各公司及实验人员青睐的实验方法。一般将不同批次后入的NC膜剪成10段4cm长度，固定住NC膜上端，将下端浸入有色色素的溶液槽中，记录整张NC膜被浸透的时间，取平均值。这个简易实验测试的就是爬板速度和孔径大小。硝酸纤维素膜的孔径越大，爬板速度越快，那么液体在膜上停留的时间就越短，相对应的免疫时间也越短，点膜时点膜原料的扩散速度就越快。文献综述

功能性包括灵敏度和特异性[8]。评估硝酸纤维素膜的功能性也叫作片材的评估。实验过程大致如下：新购买的硝酸纤维素膜与应用效能优良的玻纤，样品垫，滤纸组装成试剂条，该试剂条用标准品进行实验，观察实验结果。

硝酸纤维素膜是胶体金免疫层析技术非常重要的材料。因此，物理特性和功能特性检测是非常必要的。液体在膜上的运动速度越快，那么与包被在T-line上的抗原或抗体的免疫反应的时间就越短，灵敏度降低。相反，液体在膜上的运动速度越慢，免疫反应的时间就越长，灵敏度就越高，缺点是读数时间变长。虽然说反应时间越长，灵敏度就越高，但实际生产中我们往往也要考虑效率。所以在选择合适的硝酸纤维聚酯膜时，需要让读数时间，灵敏度，免疫时间等达到一个最优效果。

胶体金法检测幽门螺旋杆菌的实验中，点膜原料的一般配比是：配制点膜原料，C-line: 链酶亲和素偶联BSA（1。0～1。5mg/ml），羊抗鼠IgG（0。5mg/ml），糖溶液（300mg/ml）。T-line：HP抗体（0。5～1。0mg/ml），糖溶液（10mg/ml）。点膜时，喷量是0。8µl/cm。这个原料配比是通过长期实验得到的