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摘要：抗生素滥用导致的多药耐药菌感染已成为临床医学领域的重大难题。而抗菌肽(AMPs)相比传统抗生素而言具有全新的抗菌机制，有望成为一种新型的抗菌和抗肿瘤药物。在本课题中，我们通过固相合成得到一种蝎毒来源抗菌肽CTR。通过抑菌圈分析和最小抑菌浓度测定来检测其抑菌活性，并通过杀菌动力学分析和扫描电镜观察研究其杀菌机制。实验结果表明CTR有很强的杀菌能力，作用于铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度为2.93μg/mL，作用于大肠杆菌的最小抑菌浓度为11.72μg/mL。之后，我们对正常细胞和肿瘤细胞进行细胞毒性检测，并结合溶血实验来初步探究CTR的抗肿瘤活性。27425
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毕业论文关键词：抗菌肽；杀菌活性；抗肿瘤
CTR, an anti-bacterial and anti-cancer agent from scorpion venom
Abstract: Multidrug-resistant bacteria infection caused by antibiotics overuse has become a major problem which need urgently to be solved in clinical medicine field. Meanwhile, the antimicrobial peptides (AMPs) have shown brand-new antibacterial mechanism compared with the traditional antibiotics, thus it is believed to become a promising candidate for new antibacterial and antitumor drugs. In this study, we obtained a Scorpion-derived antibacterial peptide (CTR) by solid-phase synthesis. The antibacterial spectrum and the minimal inhibitory concentrationswas tested to study the antimicrobial ability of CTR. By sterilization dynamics analysis and scanning electron microscopy (SEM) observation, we can gain some information about the antibacterial mechanism of CTR peptide. The research results indicate that CTR has strong bactericidal activity, the minimal inhibitory concentration of Pseudomonas aeru ginosa is 2.93μg/mL, Escherichia coli is 11.72 μg/mL. Moreover, we explored the antitumor activity of CTR peptide by Hemolysis test as well as detection of normal and tumor cells survival rate after processing with CTR peptide.
Key words: antimicrobial peptides ; anti- bacterial ; anti-cancer
目 录
引言 3
1 材料与方法 5
1.1 材料 5
1.1.1 主要试剂 5
1.1.2 受试细菌及细胞株 5
1.1.3 主要仪器 5
1.2 方法 5
1.2.1 CTR序列的测定与分析 5
1.2.2 CTR溶液的配制 5
1.2.3 溶血试验 5
1.2.4 抑菌圈分析 5
1.2.5 最小抑菌浓度（MIC）测定 6
1.2.6 杀菌动力学实验 6
1.2.7 扫描电镜观察 6
1.2.8 细胞的复苏与传代 6
1.2.9 MTT法检测细胞毒性 7
2 结果与分析 7
2.1 序列分析 7
2.1.1 一级序列分析 7
2.1.2 二级结构分析 7
2.2 蝎毒合成多肽CTR的抑菌活性 8
2.2.1 抑菌圈分析 8
2.2.2 最小抑菌浓度（MIC）测定 9
2.2.3 杀菌动力学实验 10
2.2.4 扫描电镜观察 11
2.3 CTR对正常细胞及肿瘤细胞毒性检测 12
2.4 CTR的溶血活性检测 12
3 讨论 12
3.1 蝎毒抗菌肽的抗菌活性 12
3.2 蝎毒抗菌肽的细胞毒性 13
致谢 15
参考文献： 16
蝎毒多肽CTR抗菌及抗肿瘤机制的研究
引言
细菌性疾病一直困扰人类，而由于全球抗生素药物的滥用，越来越多的细菌可能发展成为对传统抗生素耐药的菌株。目前，所有的常规抗生素都出现了相应的抗药性致病株系，如鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌等。致病菌的抗药性问题已经日益严重地威胁着人们的健康，医药研究人员也在迫切寻求具有全新抗菌机制的抗生素替代品。抗菌肽（antimicrobial peptides，AMPs，又名抗微生物肽）是一种与抗生素相似的对外源病菌具有高效杀灭活性的肽类物质，具有很高的抗菌活性，抗菌谱较广，种类较多，并且其作用靶菌株不易产生抗性突变，这些都为抗菌肽的临床应用带来了很大的优势。因而抗菌肽已倍受人们关注，成为生物医药学科的研究热点。