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摘要：从皮肤表面出血和溃疡的鲫鱼(Carassius aumtus)肝脏中分离出一株致病菌，暂时编号为KG，并用TSA培养基分离纯化该致病菌。经革兰氏染色，发现KG菌株为革兰氏阴性杆状菌。生理生化结果显示，KG菌株不发酵山梨醇、本醇、卫茅醇、乳糖、阿拉伯糖、肌醇、木糖，对苯丙氨酸、葡萄糖酸盐、靛基质、鸟氨酸、蔗糖精、氨酸水解的酶、MR、VP、赖氨酸都为阳性反应；对硫化氢、氨对、枸橼酸盐、脲酶、棉子糖、侧金盏花醇、DNA酶均为阴性反应。初步鉴定KG菌株为文隆气单胞菌（Aeromonas veronii）。药敏结果表明，该菌株对碳青霉烯类、头孢类、氨基糖苷类、喹诺酮类、磺胺类、大环内酯类等药物高度敏感，对盘尼西林类药物不敏感，对弧菌抑制剂 O/129 不敏感。进一步为了研究其致病性，进行人工感染实验,以4.82×108cfu/ml 浓度的菌液注射健康鲫鱼腹腔，发现72h内死亡率为33%，重新从感染鲫鱼肝脏分离出致病菌，确定为致病菌。本研究有助于提高鲫鱼养殖业的经济效益。34357
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毕业论文关键词：鲫鱼；分离纯化；文隆气单胞菌；药敏试验；人工感染
Isolation and Pathogoniciyt Analysis of an Aeromonas veronii isolated from Carassius aumtus
Abstract:From the surface of the skin ulcer and hemorrhage in the liver of carassius auratus isolated strains of bacteria，Temporary number is KG,And with TSA medium for separation and purification of bacteria.By Gram staining，KG strains were gram negative bacilli.Physiological and biochemical results show that KG strains not fermented sorbitol, the alcohol, Wei Mao
alcohol, lactose, arabinose, inositol, xylose, of phenylalanine, glucose acid salt, indole, ornithine, refined sugar, amino acid hydrolysis enzyme, Mr, VP, lysine positive responses; to hydrogen sulfide, ammonia, citric acid salt, urease, raffinose, Adonis geraniol, DNA enzymes were negative reaction.The identified KG strains for Aeromonas veronii.The artificial infection experiment, with 4.82 * 108cfu/ml concentration of the bacteria solution was injected into the abdominal cavity of healthy carp, the 72h mortality rate was 33%.This study can improve the economic benefit of crucian carp breeding industry.
Keywords:Carassius aumtus;Separation and purification; Aeromonas veronii;Drug sensitivity test; Artificial infection.
目录
引言 1
1材料与方法 2
1.1 试验动物 2
1.2 实验主要试剂和仪器 2
1.3 实验方法 2
1.3.1 细菌的分离纯化 2
1.3.2 菌落形态观察（革兰氏染色法）、生理生化性质 2
1.3.3 药敏试验 2
1.3.4人工感染实验 3
2 结果与分析 3
2.1 结果 3
2.1.1 KG菌株的形态特征结果分析 3
2.1.2 KG菌株的生理生化特性结果分析 4
2.1.3 药敏试验结果分析 5
2.1.4 人工感染试验结果分析 6
3 讨论 7
4 结论 8
致谢 9
参考文献 9
引言
鲫鱼属于辐鳍鱼纲鲤形目鲤科鲫属，多产于黄河流域，长江流域一带，洱海鲫鱼较为出名。近年来由于细菌性感染导致鱼类大量死亡，造成巨大经济损失。已知的细菌性病原有嗜水气单胞菌（（Aeromonas hydrophila)[1-3]、温和气单胞菌（Aeromonas sobria）[5-6]，还有文隆气单胞菌（Aeromonas veronii）[7]。
文隆气单胞菌隶属于γ-变形菌纲（G am maproteobacteria)气单胞菌科（Aeromonadaceae)气单胞菌（Aeromonas），分布较为广泛，是一种革兰氏阴性菌。候天文[17]等从患有慢性支气管炎老年人的急性肺炎的痰液中找到了文隆气单胞菌（A. veronii）。唐毅[8]等从烂尾的华鲮尾部分离出文隆气单胞菌（A. veronii），并进行生理生化、药敏等试验。秦蕾[9]等也在患病的泥鳅皮肤中发现文隆气单胞菌（A. veronii），研究其生理生化特性和药敏谱。夏飞[10]等从患出血病症的异育银鲫皮肤中分离得到文隆气单胞菌（A. veronii），进一步进行16s rRNA鉴定、药敏和生理生化试验。文隆气单胞菌（A. veronii）是一种人-畜-鱼共患病病原菌，人类感染后，可能引发腹泻[11]、败血症[12]、胆管炎[12,13]、坏死性胫膜炎[14-15]等疾病。因此研究文隆气单胞菌具有一定的公共卫生学意义。目前从鲫鱼的体内分离出嗜水气单胞菌（A. hydrophila)和温和气单胞菌（A. sobria），但是对鲫鱼文隆气单胞菌（A. veronii）的报道较少。