硫酸亚铁 18.08±0.34 41.68±7.45 5.93±0.95 5.86±0.24
空白2 6.44±0.17 13.75±2.45 5.48±0.83 5.85±0.01
氯化钾 7.15±0.10 14.10±2.00 5.08±0.65 5.81±0.00
磷酸二氢钠 7.04±0.11 10.84±0.33 3.98±0.18 6.57±0.01
磷酸氢二钠 7.13±0.04 12.79±0.03 4.63±0.02 6.31±0.00
结果显示添加了硫酸镁的培养基总酶活和比酶活都有较好的提高,可进一步对该种金属离子浓度优化。
4.3离子浓度的优化:
选择镁离子作为最适添加离子后,在基本培养基基础上分别添加不同浓度的MgSO4•7H2O(g/L):0.1, 0.3, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0。结果见如下表4.2。
表4.2镁离子浓度对微杆菌细胞产酶的影响
Mg离子浓度(g/L) OD值 总酶活(U/L) 比酶活(U/g) final pH
0.1 8.09±0.19 13.14±0.11 4.19±0.06 5.62±0.06
0.3 8.31±0.14 14.68±1.85 4.55±0.50 5.65±0.04
0.5 10.01±0.19 15.37±1.13 3.96±0.22 5.61±0.07
1 9.74±0.25 18.28±0.34 4.84±0.03 5.54±0.01
1.5 9.93±0.12 17.12±079 4.45±0.26 5.64±0.01
2 10.09±0.14 16.00±0.35 4.09±0.15 5.59±0.01
图4.3镁离子浓度对微杆菌细胞发酵产酶的影响
结果显示1g/L的MgSO4•7H2O浓度最佳。
5 产品方案
5.1产品名称与性质
名称:生物素中间体二酯
中文别名:环酸
英文名:1,3-Bisbenzyl-2-oxoimidazolidine-4,5-dicarboxylic acid
分子式:C19H18N2O5
性 质:白色梭柱体结晶。
5.2性状及理化性质
分子量:382.41g/mol
密 度:1.278g/cm3
熔 点:111.5℃
溶解性:易溶于醇、醚和乙酸乙酯,微溶于冷石油醚,在水中为溶。
稳定性:稳定
5.3产品的质量规格
产品的收率大于95%(按二酸计算),经液相色谱分析,产品纯度>99.0%
二酸工业品(>99%),无水甲醇(AR),三甲基氯硅烷(AR)
5.4产品的生产制度
工业化日产量:788.4 kg
平均工作日:300天
工业化年产量:236.52吨/年
5.5包装与储藏
CAS编号:59564-78-2
包装方法:固态:塑料袋或二层牛皮纸袋外全开口或中开口钢桶;螺纹口玻璃瓶、铁盖压口玻璃瓶、塑料瓶或金属桶(罐)外普通木箱;螺纹口玻璃瓶、塑料瓶或镀锡薄钢板桶(罐)外满底板花格箱、纤文板箱或胶合板箱[5]。
储存:密封阴凉保存。
6生产方法与主要工艺流程
6.1生产方法
使用间歇式反应,在常压下用二酸,甲醇与三甲基氯硅烷反应,制取二酯。
6.2主要流程:
7生产工艺控制和中间体质量标准
7.1生产工艺控制
影响此反应的主要因素有:配料比、三甲基氯硅烷的用量和添加时间、反应时间、反应温度等。
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