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1.5 MTT实验 3
1.6计算IC50 4
1.7台盼蓝染色 4
1.8 Western Blot 4
2 结果与分析 5
2.1紫苏挥发油对A549细胞活力的影响 5
2.1.1 MTT实验 5
2.1.2台盼蓝染色 7
2.2紫苏油诱导A549细胞凋亡机制 8
2.2.1紫苏油对A549细胞HSP70的影响 9
2.2.2紫苏油对A549细胞P53的影响 9
2.2.3紫苏油对A549细胞凋亡相关蛋白的影响 10
2.2.4紫苏油诱导A549细胞凋亡的机制 11
3 讨论 11
参考文献 13
引言
癌症是以细胞的无限增殖为特征的，这种增殖是由基因突变或是病毒感染等原因引起的[1,2]。近年来，癌症的发病率与死亡率逐年提高，治疗难度很大。目前，针对癌症的治疗方法主要有手术治疗、放疗和化疗。但是，大多数化疗药物专一性不高，无法单独针对肿瘤细胞发挥杀伤作用，对正常细胞也具有一定的毒性。用当前的方法治疗肿瘤，存在严重的副作用，无法达到减轻患者病痛的目的。因此，开发新的抗肿瘤药物尤其重要。利用天然植物化合物治疗癌症，是一个有待开发的领域，有着极大的潜力[3]。事实上，我国利用天然植物治疗疾病有着悠久的历史。利用天然植物成分治疗肿瘤已经受到了极大的关注，在最近的研究中，证实了一些植物挥发油具有抑制肿瘤细胞生长，诱导凋亡的作用，如北艾（Artemisia vulgaris L.）[4]、杨梅（Myrica rubra）[5]、穗花牡荆（Vitex agnus castus L.）[6]。这些植物均具有阻断细胞周期，促进细胞程序性死亡的功能，而且都是以剂量依赖的方式发挥作用的。本次实验利用A549细胞，以紫苏油为研究对象，探究其是否具有抗肿瘤的作用及可能的机制。
紫苏，唇形科一年生草本植物[7]。原产于中国，在我国种植广泛，具有很高的利用价值。具有低糖、高纤文的特点。在食品和医药领域有着重要的开发价值，主要用于制作食物、香料、药物等。紫苏还具有很多保健功能，因其具有特殊的活性成分及营养物质，成为倍受世界关注的植物[8]。植物挥发油是从植物的根、茎、叶或果实中提取出来，通过水蒸气蒸馏法、压榨法提炼的挥发性芳香物质。植物挥发油用途广泛，具有多种生物活性，可以用于净化空气，预防疾病，消毒杀菌，尤其是用于制作药物和化妆品。
紫苏油具有保护肝脏、降血脂、抗过敏炎症、改善记忆的作用。紫苏油稳定性高，不含胆固醇，含有高达60%的α-亚麻酸，是植物油中α-亚麻酸含量最高的，而且富含ω-3脂肪酸。α-亚麻酸能够降低胆固醇，具有预防癌症、治疗癌症的作用，能够抑制肿瘤细胞的增殖，肿瘤细胞的转移[7]。在近期的研究中还发现，紫苏油中的化合物还具有抗氧化，抗真菌的作用[9]。
利用天然植物紫苏进行肿瘤治疗，毒副作用小，对机体损伤程度低。在现实生活中，可以摘取紫苏嫩叶直接做菜、泡茶。紫苏既可以食用，也可以入药。根、茎、叶、花和种子，均具有很高的营养价值，而且含有紫苏醇、紫苏酮、薄荷醇、芳樟醇、柠檬烯、丁香酚等化学物质[7]，具有独特香和杀菌防腐等多种作用。其整株均可入药，为常用中药。因此紫苏是一种毒副作用极小的潜在治疗癌症药物的原材料。而且紫苏在我国种植广泛，各个省份均有种植，原材料丰富，不会受到原料不足的限制，应用前景广阔，经济效益高。
在本次研究中，我们发现紫苏油可以诱导肿瘤细胞的caspase依赖性凋亡途径。用一定浓度的紫苏油处理肿瘤细胞后，细胞出现凋亡现象，而且随着紫苏油浓度的增加，凋亡的细胞数也随之增加。实验结果证明，紫苏挥发油具有很好的体外抗肿瘤活性，有进一步开发为抗肿瘤药物的潜力。实验中，我们还对十个不同产地紫苏油的抗肿瘤活性进行比较，并通过测定凋亡相关蛋白含量的变化，初步研究其诱导细胞凋亡的机制。
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