2.2.6 倒置显微镜观察细胞形态 9
2.2.7 DPPH自由基清除活性试验 9
2.2.8 划痕实验 9
2.2.9 流式细胞仪检测细胞周期分布 10
2.2.10 数据分析 10
3.结果与分析
3.1 对A549细胞形态和数量的影响 11
3.2 对A549细胞迁移的影响 11
3.3 DPPH自由基清除活性实验测曲克芦丁清除率 11
3.4 流式细胞仪检测细胞周期分布 11
讨论 12
谢 辞 12
参考文献 13
1.引言
1.1 肺癌
肺癌(Lung Cancer)是当今威胁人类最严重的一种肿瘤疾病,它凭借着高发病率和死亡率独占榜首【1,2】。肺癌的形成至今我们都不能清楚了解,大量资料表明,主要是肺腺癌发病率最高,同时也最难治疗,所以我们有必要研究对肺癌细胞的生长周期以及抑制作用。
现在癌症的治疗方法主要有:手术治疗,化学治疗,放射线治疗这三种。
现在我们医学上主要以化学治疗为主,配合手术。现在的药物对癌症细胞有作用但是不是特别明显。所以现在我们找到对癌症细胞有抑制作用的药物至关重要。
1.2 A549细胞
A549细胞是II型肺泡上皮细胞【3】,可以进行连续体外培养。它不仅有上皮细胞的特征,还具有恶性肿瘤的特征【4,5】,所以我们以肺腺癌A549细胞为细胞模型,检测其受药物影响的增殖和迁移的影响,为临床肺腺癌的治疗提供理论依据。目前治疗癌症的药物大多都有较强的毒性,因此我们要不断去发现新的药物来治疗癌症。源`自·优尔.文/论:文'网,www.youerw.com
1.3细胞增殖
细胞增殖对细胞有着重大的作用,有丝分裂。无丝分裂和减数分裂是细胞分裂的基本方法。成熟体仍然要进行细胞增殖,替代死亡的细胞,保持细胞的数量平衡。细胞增殖能够治理机体创伤和病理组织修复等其他细胞疾病。
1.4 黄酮类化合物 曲克芦丁
曲克芦丁属于生物黄酮类,在自然界广泛存在的,是人们生活不可缺少的重要部分,在医学上经常用于治疗心血管疾病[6]。医学研究表明曲克芦丁可以防止血管内血栓的形成,成功疏通人体血管的阻塞【7】。分子生物学表明,曲克芦丁对癌细胞扩散、增殖有极大的抑制作用,所以我们以曲克芦丁为模板,研究其对肺癌A549细胞的抑制活性。
1.5 氧化压力与肿瘤
我们取曲克芦丁培养液上清液来实验,通过一系列操作测得上清液中曲克芦丁的清除率,来说明曲克芦丁对A549细胞的作用【8】。
1. 6 细胞周期
是细胞在有丝分裂方式下,从亲代到子代,分裂结束的这一过程。这一过程反复进行,可分为若干阶段,即G1期,S期 ,G2期和M期【9,10】。
在分裂过程中,DNA随着阶段不同,的含量也不相同,G2、M期为G0、G1期的两倍,S期则在两者之间,因此通过PI标记,可得出细胞在不同阶段的DNA含量情况。