多年来,人们一直在探索并希望获得恶性肿瘤出现前或刚出现痕迹时的标志性物质,即肿瘤标志物。迄今为止,医学生物学所能鉴定出的各种肿瘤标志物,多为利用所制备的抗体从体液或组织细胞中检测出各种抗原[ 7],这些抗原绝大多数为糖蛋白,即含有异常糖链糖蛋白[ 2]。研究表明,目前临床常用的肿瘤标志物如甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)以及CA系列等均为异常糖链糖蛋白[ 8-9]。制备的抗体所能识别的特异位点位于肿瘤标志物(异常糖链糖蛋白)的糖链,而非蛋白结构[ 10]。因此,对蛋白质糖链结构的测定目前已成为临床实验室诊断恶性肿瘤的一个新方向,它克服了传统的以蛋白质量变来诊断疾病时特异性不高的缺点,可在蛋白质“量”无明显改变的情况下,仅根据其糖链部分变化产生的“质”变(异常糖链糖蛋白)来诊断疾病,因而具有灵敏度高、特异性强的优点。利用血清中异常糖链糖蛋白诊断恶性肿瘤是肿瘤诊断的一个新方向,从此开辟了肿瘤诊断“糖链标志”新领域。
1.2.2 凝集素与异常糖链糖蛋白
异常糖蛋白糖链直接测定很困难。凝集素是一类糖结合蛋白,它能专一的识别某一特定结构的单糖或寡糖中特定的糖基序列并与之结合,它们是检测肿瘤相关糖蛋白中异常糖链结构的有力工具,不同的凝集素可以结合不同的糖链。因此,临床上常通过凝集素进行糖链结构分析,进而鉴别异常糖链。常用的凝集素及其识别的糖链结构如下:
表1常用的凝集素及其识别的糖链结构源'自:优尔`!论~文'网www.youerw.com
凝集素 可结合的糖链结构
麦胚凝集素() Bis-GlcNAc,SA
刀豆凝集素() 二天线(无bis-GlcNAc)、高甘露糖型、杂合型
曼陀罗凝集素 多天线、偏二天线
小扁豆凝集素 核心Fuc
E型红腰豆凝集素 Bis-GlcNAc
L型红腰豆凝集素 二天线(含bis-GlcNAc)、C2C2,6三天线、C2,4C2,6四天线
桔果粉孢凝集素 Fucal→
花生凝集素 GalB1→3GleNAc
普通蓖麻凝集素(RCA-I) GalB1→4GleNAc
朝鲜槐凝集素(MAA) SAn2→3GalB1→4GleNAC
1.3 TAP检测原理
异常糖链糖蛋白并不取决于恶性生成物的固定位置和组织学结构,是各种肿瘤的共性物质,当肿瘤细胞产生的TAP量达到一定程度时,即可以在末梢血液中检出。异常糖链糖蛋白TAP检测试剂盒含有凝集素(凝集素组合),通过辅助和促进多种异常糖链糖蛋白相互凝聚成特异形状的类晶体凝聚物,在TAP检测用图像分析仪或生物显微镜下,可以观察到特意图像,这种特意图像与没有TAP的血液与本试剂所生成的图像有显著的区别,从而可做出受检者血液内有无TAP及其含量多少的结论[ 11]。