1.5.1 苯并芘的不同检测分析方法
对苯并芘的检测分析方法,有从早期发展起来的薄层色谱法、纸色谱法,到后来出现的气相色谱法、高效液相色谱法、荧光分光光度法和愈发成熟的气相色谱-质谱联用法、毛细管电泳分析法等[ , ]。
(1) 纸色谱法(Paper Chromatography,PC)与薄层色谱法(Thin Layer Chromatography,TLC)
在早期,薄层色谱法、纸色谱法是分离PAHs类物质的常用方法,荧光检测技术与紫外相配合的效果尤佳。纸色谱法采用乙酞化滤纸作固定相,薄层色谱法则是上世纪中叶在纸色谱法基础上发展起来的,采用硅胶或氧化铝作固定相吸附剂,因为具有操作简单、设备简易等特点,是应用最普遍的分析研究方法之一。但其缺点是分离度较差、影响因素较多、灵敏度低和较差的重现性。
(2) 气相色谱法(Gas Chromatography,GC)
气相色谱法以气体为流动相,按照固定相的聚集状态分为气固色谱和气液色谱,按柱的粗细也分类为一般填充柱与毛细管柱两种色谱法,在应用化学领域已经有几十年的历史,是比较成熟的分析手段之一。气相色谱法适用于热稳定性好、沸点低、易汽化的物质的分析,相反对于熔点高、对热不稳定、极性大和不易挥发的物质,则分析结果不佳,保留时间过长且峰型差,有时甚至不出峰。气相色谱法的优点在于高效率、高灵敏度、高选择性,缺点是使用高压气作为流动相带有一定的危险性,且操作比较复杂,对所需测定的物质的理化性质要求较高。
(3) 气相色谱-质谱联用法(GC-MS)
气相色谱-质谱联用技术近年来愈发成熟,是现在最常用的检测挥发性高的有机物的方法,在国外已经发展成为常规的PAHs分析检测方法。质谱法可以直接对样品进行定性分析,但对样品纯度要求很高,而气相色谱与质谱联用,则有在多种有机化合物同时存在的条件下对样品同时进行定性定量分析的优点,另外还有用量少、简便易行、选择性高、灵敏度高、分析速度快等特点。目前还有将GC-MS与固相微萃取技术相结合的方法,大大缩短了分析时间,减少了人为误差[ ]。气相色谱-质谱联用技术的缺点是对样品纯度的要求仍比较高,且对含有四到优尔个苯环的高沸点PAHs的分离存在困难。
(4) 高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)
高效液相色谱法是上世纪七十年代发展起来的一种新型仪器分析技术,现已逐步应用于物质分析的许多方面,近十多年在高沸点化合物的分析检测上取得较大的发展。高效液相色谱法通过不断的进步,在保留了经典液相色谱可选流动相种类多、样品使用范围广等特点的同时,不受挥发性和热稳定性的限制,具有分离效果良好、灵敏度高、定量准确的优点。
高效液相色谱法常用的检测器有紫外检测器(UV)、质谱检测器(MS)、荧光检测器(FLD)、蒸发光散射检测器(ELSD)和二极管阵列检测器(PDA)等。国家规定的肉制品中PAHs检测方法就是采用高效液相色谱法,以甲醇和水进行梯度洗脱,采用紫外检测器,但是,易产生基线漂移,检测时间也稍长[ ]。
(5) 毛细管电泳法(Capillary Electrophoresis,CE)
毛细管电泳法是以高压直流电场为驱动力,以毛细管为分离通道,是色谱和电泳相结合的新型液相分离分析技术,历史相对较短,但发展十分迅速。毛细管电泳法主要靠样品各组分间淌度和分配行为的差异实现分离。因其理论塔板数高、柱子长、进样端与检测端均无死体积而具有较高的柱效,毛细管电泳法还是目前自动化程度最高的分析检测方法之一[ ],另外还具有高灵敏度、快速、进样量少、运行成本低、应用范围广、对环境的污染小等特点,可适用于分离除挥发性和难溶物以外的各种物质。在毛细管电泳法的基础上,后来又进一步发展出了胶束电动色谱法和微乳毛细管电动色谱等新方法。
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