目  录

第一章 绪论 1

1。1 异槲皮苷 1

1。1。1 异槲皮苷的药效 1

1。1。2 异槲皮苷的来源 2

1。1。3 异槲皮苷的生物合成 2

1。2 固定化酶 3

1。2。1 使用的纳米粒子石墨烯 3

1。2。2 固定化酶研究进展 4

1。2。3固定化酶载体的性能要求 5

1。3微反应器 5

1。3。1微反应器的制作材料 5

1。3。2微反应器的技术特点 6

1。3。3 微反应器在生物催化中的应用 7

1。4 课题研究目的和主要内容 8

1。4。1 本课题的研究目的 8

1。4。2 本课题的主要内容 8

1。4。3 技术路线图 9

第二章 实验材料和方法 10

2。1 实验药品与仪器 10

2。1。1 实验材料 10

2。1。2 实验药品 10

2。1。3 实验仪器 10

2。2 纳米粒子种类的筛选和酶负载量的检测方法 11

2。2。1 固定化载体筛选的方法 11

2。2。2 考马斯亮蓝法测定酶浓度 12

2。3纳米粒子固定化酶最佳固载条件的优化确定 12

2。3。1 固定化酶制备方法 12

2。3。2固定化酶最佳固载条件 12

2。3。3 纳米粒子固定化酶的表征 13

2。4纳米粒子固定化酶用于异槲皮苷的酶促定向合成工艺 13

2。4。1 缓冲液、芦丁液和柚皮苷酶液的配制 13

2。4。2 芦丁及异槲皮苷的分析检测方法 14

2。4。3 芦丁和异槲皮苷标准曲线的制作 14

2。4。4常规反应器中缓冲液的筛选 15

2。5纳米粒子固定化酶在微反应器催化合成异槲皮苷的研究 15

2。5。1 常规反应器中酶促反应制备异槲皮苷 15

2。5。2 微反应器中酶促反应制备异槲皮苷 15

2。5。3 固定化酶的重复利用 16

2。6 反应动力学速率测定 16

2。6。1 常规反应器酶促反应动力学 16

2。6。2 微反应器酶促反应动力学 16

2。7 统计分析 16

第三章 结果与讨论 18

3。1 纳米粒子种类筛选及酶含量测定结果 18

3。1。1 纳米粒子石墨烯等载体的筛选