苦瓜多糖的提取及抑菌性研究(2)
2.3.5抑菌性研究 9
2.3.5.1菌悬液及孢子悬浮液的制备 9
2.3.5.2滤纸片法测定苦瓜多糖抑菌活性 9
3. 结果与讨论 10
3.1葡萄糖标准曲线 10
3.2 单因素实验 10
3.2.1超声波功率 10
3.2.2液料比 11
3.2.3 pH值 11
3.2.4提取温度 11
3.2.5纤文素酶量 12
3.3.正交试验 13
3.4苦瓜多糖的抑菌活性 14
4. 结论 15
致谢 16
参考文献 17
1.引言
1.1 苦瓜生物学特性
苦瓜又称为凉瓜，葫芦科苦瓜属植物。原产于亚洲热带地区广泛分布于热带、亚热带和温带。在我国明代就已有种植，现在以华南和长江流域地区栽培为盛，逐渐向北方地区推广，并已成北方保护地栽培的主要特种蔬菜作物之一。苦瓜的化学成分较为复杂，国内外学者采用不同方法对苦瓜进行了提取分离及鉴定，从苦瓜中分离出三萜、甾类、生物碱、蛋白、有机酸及多糖类等多种化学成分[1]。
苦瓜富含蛋白质、糖、VA、VB、VC及各种必需氨基酸等。其不仅有良好的食用价值，而且还有明显的药用功能，素有“药用蔬菜”之称。中国医学认为苦瓜的完整植株都可以供药用，并且被历代临床应用于治疗肿瘤、痢疾、肠炎、中暑等症。另根据《本草纲目》里的记载：苦瓜“苦寒、无毒、除邪热、解劳乏、清心明目、益气壮阳”。而且现代研究也证明，苦瓜具有降血糖、抗肿瘤、抗病毒、抑菌、免疫调节等生物学活性[2]。
苦瓜多糖是由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的杂多糖，其百分组成分别为24.03%,16.47%,6.7%,24.84%和27.94%。近年来，多糖及其衍生物作为生物效应调节剂已经逐渐成为目前天然药物的研究热点之一。而我国对多糖在医药领域中的应用研究进展很快，研究的范围涉及理化性质、免疫学、药理学及应用等。许多植物多糖都具有免疫调节活性，能够增强机体巨噬细胞、淋巴细胞等免疫系统的功能及激活或促进抗体、补体的生成和干扰素的诱生；多糖也可用于糖尿病的防治，促进胃溃疡愈合和修复，具有抗辐射、降血脂等多种功效[3]。
1.2 苦瓜多糖的作用
1.2.1降血糖与降血脂的作用
苦瓜降血糖作用的研究开始于二十世纪60年代，发展到现在已涉及到苦瓜中降糖活性成分降糖机制的研究领域。在较早的研究阶段，研究者们曾认为苦瓜降血糖的机制可能与增强胰岛B细胞分泌胰岛素的能力有关。但Shubhashish等的试验表明，苦瓜醇提取物能增加小鼠肝内葡萄糖的利用率，暗示却与胰岛素的分泌物没有关系；董英等通过对苦瓜多糖最佳降糖活性成分的降血糖功能及其机制的研究发现：大分子苦瓜多糖的降糖效果较好，其机制可能是通过减弱链脲霉素对胰岛B细胞的损伤或改善受损B细胞的功能，从而起到调节血糖的作用；Sitasawad等研究了苦瓜浆汁对经STZ处理的小鼠的胰腺、RIN细胞、分离的胰岛细胞的作用，试验结果均显示苦瓜浆可显著降低三者STZ所致的脂质过氧化作用[4]。
1.2.2抗病毒的作用
现在，国内外对于苦瓜抗病毒方面的研究已深入到对其活性成分的化学结构鉴定和作用机理方面。其中，苦瓜提取物中的蛋白和多肽是最具代表性的活性成分，其化学结构及功能已研究的较为成熟，尤其对MAP30的研究。苦瓜中的MAP30蛋白能抑制HIV活性，使HIV在接触苦瓜提取物4天内抗原活性完全不表达，有选择的杀死被HIV感染的淋巴细胞和巨噬细胞，能够抑制单核细胞HIV[5]。
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