多裂鱼黄草组织培养初探+文献综述(3)
1.2.3多裂鱼黄草植物国内外研究现状
我国广东沿海岛屿有分布记录，但未看到标本，可能为栽培或逸生。本种原产美洲，在非洲，印度，东南亚，以至澳大利亚的昆士兰通常已归化栽培作观赏，偶为逸生。【2】
1.3 植物组织培养技术
1.3.1 植物组织培养的定义和目的
植物组织培养（plant tissue culture)是指在无菌条件下，将离体的植物器官（根、茎、叶、花、果实、种子等）、组织（如形成层、花药组织、胚乳、皮层等）、细胞（体细胞和生殖细胞）以及原生质体培养在人工配制的培养基上，并给与适当的培养条件，使其长成完整的植株的过程。用于培养的植物体或一部分器官、组织、细胞、细胞器叫做外植体（explant)，并且可在人工控制条件下，使其按照人们意愿去分化或产生所需的部分或产物，为人类造福。【3】
1.3.2 植物组织培养发展简史
植物细胞组织培养的研究开始于1902年德国植物学家Haberlandt，至今已有100余年的历史。它的发展过程大致分为以下3个阶段。
（1） 探索阶段
在Schwann和Schleiden创立的细胞学说基础上，1902年Haberlandt提出，高等植物的器官和组织可以不断分割，直至成单个细胞的观点。在于其1902年发表的“植物离体细胞培养实验”报告中还提出了胚囊液在细胞培养中的作用和看护培养法等科学预见。
1904年Hanning在无机盐和蔗糖溶液中培养萝卜和优尔根的胚，并使其在离体条件下发育成熟。1909年，Kuster将植物原生质体进行融合，但融合产物未能存活下来。1922年，美国的Robbins和德国的Kotte分别报道离体培养根尖获得某些成功，这是有关根培养的最早的实验。Laibach(1925,1929)将由亚麻中间杂交形成的幼胚在人工培养基上培养至成熟，从而证明了胚培养在植物远缘杂交中利用的可能性。
（2） 奠基阶段
1933年我国学者李继侗和沈同研究银杏的胚培养，将银杏胚乳的提取物加入培养基，获得成功。1934年，美国的White由番茄根建立了第一个活跃生长的无性系，使根的离体培养首次获得了真正的成功。
与此同时，法国的Gautheret(1934)在培养山毛柳和黑杨等植物的形成层组织时发现，虽然在含有葡萄糖和盐酸半胱氨酸的Knop溶液中，这些组织也可以不断增殖几个月，但只有在培养基中加入B族文生素和生长素IAA后，山毛柳形成层组织的生长才能显著增加。
1939年Gautheret连续培养胡萝卜根形成层获得首次成功。同年，White由烟草种间杂种的瘤组织，Nobecourt由胡萝卜根组织，也获得了连续生长的组织培养物。
20世纪30年代，植物细胞组织领域出现了两个重要发现：一是认识了B族文生素对植物生长的重要意义；二是发现了生长素是一种天然的生长调节物质。加上Gautheret，White和Nobecourt三者所建立的基本培养方法，奠定了之后各种植物细胞组织培养的技术基础。
1941年Overbeek等在培养基中加入椰子汁，是曼陀罗的心形期幼胚培养成熟，自此，椰子汁开始广泛地应用于植物细胞组织培养中。Skoog(1944)以及Skoog和崔澂等（1948）在烟草离体培养中发现，腺嘌呤或腺苷不仅能促进愈伤组织的生长，而且还能解除培养基中生长素（IAA)对芽形成的抑制作用，诱导芽的形成，从而确定了腺嘌呤与生长素的比例是控制芽和根形成的重要条件。
1952年，Morel和Martin首次通过茎尖分生组织培养获得大丽花的无病毒植株。1953年，Muir将万寿菊和烟草的愈伤组织转移到液体培养基中，放在摇床上振荡，获得由单细胞和细胞团组成的悬浮培养物，而且可以继代繁殖。1955年，Miller等发现了激动素（kinetin)，同时发现激动素比腺嘌呤活性高3万倍。1957年，Skoog和Miller提出通过改变细胞分裂素/生长素的比率，能够调节植物的器官形成。1958年，Steward等报道在胡萝卜根韧皮部细胞培养中，形成了体细胞胚，并使其发育成完整植株，第一次证实了植物细胞的全能性。｛4