3 实验结果 10

3。1 所提取华鳈组织 DNA 的浓度 10

3。2 华鳈 IGF 基因的 PCR 扩增结果 11

3。3 IGF 基因的系统进化树与其他物种的相似性比较 11

3。4 氨基酸同源性对比结果 13

4 讨论 15

结 论 16

致 谢： 19

1 引言

随着近年来国家对渔业发展支持力度的加大，来自优I尔Y论S文C网WWw.YoueRw.com 加QQ7520~18766 各科研院校对鱼类生长发育及品种改良 的研究已不再局限于传统方法的饲养及育种，而是转变采用现代分子生物学的方法，对影 响鱼类生长及繁育情况的功能基因进行研究，力求尽早全面了解这些基因的功能，以便将 实验研究成果应用到实际中。

1。1 华鳈的概述

华 鳈 (Sarcocheilichthys  sinensis) 隶 属 于 鲤 科 、 鮈 亚 科 （ Gobioninae ） 、 鳈 属

（Sarcocheilichthys），俗称花石鲫、黄棕鱼，是一种生活于水体中下层的小型鱼类,在我 国平原地区的大部分河流及其附属水体均有分布。因其体色鲜艳、易于饲养等特点，作为 观赏鱼，受到人们的喜爱，且华鳈数量较多，且肉质肥美，有一定的经济价值。目前，华 鳈的研究较少，主要在华鳈驯养和人工繁殖等方面。

1。2 胰岛素样生长因子的研究概况

胰岛素样生长因子（insulin like growth factors, IGFs）又叫做“类胰岛素生长因子”， 是因其结构与胰岛素类似而得名的，也被称为“生长激素介质[1]，是胚胎及动物出生后生 长的主要决定因素，同时也是生长激素（growth hormone, GH)产生生理作用过程必须的一 种活性蛋白多肽物质。从低等的圆口类到高等的哺乳动物中都发现了，广泛存在于脊椎动 物中。由于其结构与胰岛素相似，并且在离体条件下具有胰岛素样作用，能与胰岛素受体 竞争性结合，后来被正式命名为胰岛素样生长因子（IGFs），包括 IGF-Ⅰ和 IGF-Ⅱ[2]。在鱼上，虹鳟的 IGF2 c DNA 被首次克隆出来的[3]，此后，鲷[4]，澳洲肺鱼[5]，罗非鱼 [6]，杜父鱼[7]，斑马鱼[8]，河豚[9]，大菱鲆[10]，大麻哈鱼[11]等多种硬骨鱼类和软骨鱼类的 IGF-2 被全部或部分克隆。2002，Tse [12]等克隆了鲤鱼 IGF2 序列，并对其组织表达做了分析。 目前在多种鱼类中已开展了 IGF 基因的研究，而华鳈中的相关研究尚未报道。本研究通过 克隆法获得华鳈 IGF 基因序列，并搜寻该基因的多态性位点，为今后该基因对华鳈生长性 状的影响及关联性分析及基因功能研究奠定基础。论文网

IGF-Ⅰ也被称为生长介素 C（Somatomedin C），是在分子结构上与胰岛素类似的一种 多肽蛋白物质。成熟的 IGF-Ⅰ是由 70 个氨基酸（amino acid,aa）组成的单链碱性多肽，分 子量约为 70 KD，等电点约 8。6，保守性非常高。IGF-Ⅰ的一级结构与胰岛素 49%同源[13]。IGF-Ⅱ又称为生长介素 A（Somatomedin A），因与胰岛素在结构上具有约 40%的同源 性而得名，是一类小分子单链多肽，其相对分子质量为 7471 Da，有 67 个氨基酸残基，是 中性肤肽，等电点为 6。7[14]。IGF-Ⅰ主要存在血液，大部分是由肝脏合成，其作用方式有两种：一是受到 GH 调节 的内分泌形式，二是以自分泌或旁分泌形式刺激细胞的生长分化。IGF-Ⅰ通过与 IGF-Ⅰ受 体的结合而发挥生物学效应。IGF-Ⅰ具有和 Insulin 样双重作用，能促进细胞对葡萄糖的摄 入和氧化，加速氨基酸的转运，促进 DNA 的合成，通过介导 GH 促进多种组织细胞生长 代谢[15]。IGF-Ⅱ是一种促细胞分裂的多肽，其结构与胰岛素类似，在所有胰岛素的靶细胞中发 挥着类似胰岛素的功能。另外，更为重要的是它可作为生长激素的中间信使，传递着生长 激素，对机体的生长和发育起重要作用[16]。在动物上，IGF2 的表达水平与动物骨骼肌的发 育调控有关，它是影响猪产肉性能的主要功能基因之一。IGF-Ⅱ基因在未成熟的和成熟的硬骨鱼的肝组织和非肝组织中充分达，包括鲤鱼，虹 鳟鱼，斑马鱼，杜父鱼，罗非鱼，鲷及河豚。