100mg/ml  氨苄青霉素母液：溶解 1g  氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml，过滤除菌，分装成小份于﹣20°C 贮存。 琼脂糖凝胶电泳溶液[12, 13]：50×TAE 电泳缓冲液（储藏）：称取 242g Tris，18。612g EDTA 于 1L 烧杯中，向烧杯 中加入约 800ml 去离子水，充分搅拌均匀，加入 57。1ml 的冰乙酸，充分溶解，用 NaOH 调 pH 至 8。3，加去离子水定容至 1L 后，室温保存。

1×TAE 电泳缓冲液（实验）：取 50×TAE 电泳缓冲液 50ml,加蒸馏水至终体积为 2。5L。1%琼脂糖凝胶：称取 1。0g 琼脂糖，加入 100ml1×TAE 电泳缓冲液溶解。

2。1。3 培养基

PDA 培养基：马铃薯去皮，称取 200 g 切成小块，加水(<1000ml)煮沸 30 分钟，八 层纱布过滤，取滤液，加入葡萄糖 20g，加自来水至 1000ml，121°C  高压蒸汽灭菌 20

分钟。

木聚糖诱导培养基：将 PDA 中的 20g 葡萄糖换成 20g 木聚糖,其余同 PDA 培养基。

LB  培养基（液体）：酵母粉 5 g，胰蛋白胨 10 g，NaCl 10 g，加蒸馏水至 1000ml， 121°C  高压蒸汽灭菌 20 分钟[14]。

LB 培养基（固体）：酵母粉 5 g，胰蛋白胨 10 g，NaCl 10 g，加蒸馏水至 1000ml， 加入 20g/l 的琼脂。121°C 高压蒸汽灭菌 20 分钟。抗性筛选时加入氨苄青霉素母液至终 浓度为 100ug/ml[15]。

2。1。4 主要仪器

SPX-250B 生化培养箱 购自上海佳胜实验设备有限公司 SW-CJ-2D 型双人单面净化工作台 购自苏州净化设备有限公司 高速冷冻离心机 HR21M 购自湖南赫西仪器设备有限公司电子天平 FA2004B 购自北京赛多利斯天平有限公司

DYY-10C 型凝胶电泳仪器 购自北京市六一仪器厂文献综述

HD-930DHG-9420B 型电热恒温鼓风干燥箱 购自上海精宏实验设备有限公司 雷磁 pHS 数显 pH 计 购自上海精密科学仪器有限公司

Universal HoodⅡ凝胶成像仪 Bio-Rad

EPED-E2-10TF 纯水仪 购自南京易普易达科技有限公司

HH-S 恒温水浴锅 购自金坛市亿通电子有限公司

SH2-Ⅲ型循环水真空泵 购自上海亚荣生化仪器厂

FM-50 型雪花制冰机 购自上海比郎仪器有限公司

WH-3 微型漩涡混合仪 购自上海泸西分析仪器有限公司

LS-75HJ 型高压灭菌锅 购自江阴滨江医疗设备有限公司

HD-930 型组合式全温摇床 购自太仓市博莱特实验仪器厂

2。2 实验方法

2。2。1 黑曲霉的培养

将存于超低温冰箱中的黑曲霉菌种进行活化，接种于 50mlPDA 液体培养基中，30°C，150rpm,培养 2-3 天。