1。1。2 铝对植物的生长发育的影响

通常情况下，在土壤固相部分中铝主要是铝硅酸盐矿物和氧化物等形态存在，对植物的生长是没有毒性的。但当土壤发生酸化时，土壤铝会从固相释放进入土壤溶液或以交换性铝吸附于土壤表面的阳离子交换位点上，这种条件下的铝被称为高活性铝，对生物具有毒害作用[2]。

铝对植物的根、茎、叶、芽、幼苗都有很大的毒害作用，抑制植物根尖（根冠、伸长区和分生组织）的伸长是体现毒害最明显的，也是用来测定植物铝毒害最常用的指标[3]。除此之外，植物在铝处理下还会出现根部短而粗，变成褐色，分支变少，根尖膨胀，表皮和根管部分脱落，导致结构被破坏，组织坏死；会抑制种子萌发[4,5]；影响植物对水分和矿质元素的吸收和转运[6,7]；铝胁迫会增加植物对其他胁迫，特别是干旱胁迫的敏感性[8]；铝胁迫还造成叶片叶绿素含量下降，并降低植物对光的利用效率进而降低植物的光合效率[9]。

1。2 立题依据和研究意义

马尾松长期作为华中、华南地区林业发展的供给者具有适应性强、生长速度快、产量丰富、用途广泛和综合利用程度高等优点。但当土壤中铝含量过高时对于马尾松的生长就存在抑制。本次实验就铝对马尾松种子萌发、幼苗生长的影响进行探究，为了研究铝对马尾松的生长发育的机理，希望也能给土壤中含铝量高的地区进行马尾松育林和造林工作给予一定的参考意见。

2 材料与方法

2。1 材料培养与处理

2。1。1 材料培养

选择马尾松（Pinus massoniana）作为实验材料

选取籽粒饱满马尾松种子放在4°C冰箱中春化3天，在超净工作台中采用75%酒精表面消毒30s，1%次氯酸钠消毒10min，并分别用无菌水清洗6次，在培养皿底部垫上3层滤纸，将处理好的种子均匀的播种到培养皿中，尽量保证分布疏稀均匀，培养皿用封口膜密封好，放到培养温室中，相对湿度设置为75%，设定温度22±2°C，光周期为8h光/16h暗，光照强度为80 m-2s-1。

2。1。2 不同浓度的Al处理马尾松

配制出不同质量浓度的氯化铝（质量浓度为：0。1mmol、0。5mmol、1mmol、5mmol）。在每个培养皿中铺上3张滤纸，并用不同浓度的AlCl3将滤纸浸湿，再将培养了几天的马尾松，平均分成五个处理组，每个处理组设置四个重复，均匀放在不同浓度AlCl3浸湿的培养皿中培养，再用缓冲液调节pH为4。0。

处理几天后用剪刀剪下马尾松的根部，用滤纸吸干水分，称重，液氮速冻，然后保存在-80℃超低温冰箱备用。

同时，也用不同质量浓度的氯化铝溶液浸泡马尾松的种子，几天后采用冷冻保存备用。

共种植五批材料，每批20个培养皿，然后将三批材料每个处理的马尾松幼苗混合用来提取蛋白。

2。2 仪器与试剂

2。2。1 主要仪器设备

pH计（Thermo，USA）、移液枪（Eppendorf，Germany）、冷冻离心机（Heraeus，Germany）、恒温水浴锅（DK-S24，上海精宏）、紫外分光光度计（Cary 50，Varain，USA）

2。2。2 主要试剂

考马斯亮蓝G250、氯化铝、过氧化氢、丙酮、愈创木酚、无水乙醇、1 mM的乙二胺四乙酸二钠（EDTA）、牛血清蛋白（BSA）、硫代巴比妥酸（TBA）、氯化硝基四氮唑蓝（NBT）、核黄素、抗坏血酸（AsA）

2。3 测定生理指标来自优I尔Q论T文D网WWw.YoueRw.com 加QQ7520~18766

2。3。1 发芽率及根长和叶绿素含量的测定

1．发芽率及根长测定：随机选取不同浓度梯度Al处理14天的马尾松5株用直尺量取根长，然后计算其平均根长，并记录数据。将不同浓度的梯度Al处理的种子发芽情况进行统计，计算各组平均值，并记录数据。